Dallimi kryesor – Kultura e qelizave primare dhe sekondare
Para se të diskutojmë ndryshimin midis kulturës qelizore primare dhe sekondare, le të përcaktojmë së pari shkurtimisht se çfarë është kultura qelizore. Kultura e qelizave është procesi i heqjes së qelizave nga një kafshë ose bimë dhe rritja pasuese në një mjedis të kontrolluar artificialisht. Qelizat mund të hiqen drejtpërdrejt nga indi dhe të ndahen me metoda enzimatike ose mekanike ose mund të rrjedhin nga një kulturë që tashmë është krijuar. Dallimi kryesor midis kulturës qelizore primare dhe sekondare është se qelizat për kulturën e qelizave primare merren direkt nga një ind kafshësh ose bimor, ndërsa qelizat për kulturën e qelizave sekondare merren nga një kulturë primare tashmë e krijuar. Prandaj, kultura sekondare është një kulturë e re e origjinës nga kultura parësore.
Le të shohim më tej kuptimin e kulturës së qelizave primare dhe dytësore në mënyrë që t'i diferencojmë ato më mirë.
Çfarë është kultura primare e qelizave?
Kultura primare e qelizave është shkëputja e qelizave nga një kafshë prindërore ose indi bimor nëpërmjet masave enzimatike ose mekanike dhe mbajtja e rritjes së qelizave në një substrat të përshtatshëm në enë qelqi ose plastike në kushte të kontrolluara mjedisore. Qelizat në kulturën parësore kanë të njëjtin kariotip (numri dhe pamja e kromozomeve në bërthamën e një qelize eukariote) si ato qeliza në indin origjinal. Kultura primare e qelizave mund të klasifikohet në dy në bazë të llojit të qelizave të përdorura në kulturë.
Qeliza e varur ose ngjitëse e ankorimit – Këto qeliza kërkojnë një lidhje për rritje. Qelizat ngjitëse zakonisht rrjedhin nga indet e organeve, për shembull nga veshkat ku qelizat janë të palëvizshme dhe të ngulitura në indin lidhor
Qeliza të pavarura ose pezulluese të ankorimit – Këto qeliza nuk kërkojnë një lidhje për rritje. Me fjalë të tjera, këto qeliza nuk ngjiten në sipërfaqen e enës së kulturës. Të gjitha kulturat e pezullimit rrjedhin nga qelizat e sistemit të gjakut; për shembull, limfocitet e qelizave të bardha të gjakut pezullohen në plazmë
Qelizat që rrjedhin nga kulturat parësore kanë një jetëgjatësi të kufizuar. Qelitë nuk mund të mbahen për një kohë të pacaktuar për disa arsye. Rritja e numrit të qelizave në kulturën primare do të çojë në shterjen e substratit dhe lëndëve ushqyese. Gjithashtu, aktiviteti qelizor do të rrisë gradualisht nivelin e metabolitëve toksikë në kulturë duke penguar rritjen e mëtejshme të qelizave.
Në këtë fazë, duhet të kryhet një dytësore ose një nënkulturë për të siguruar rritjen e vazhdueshme të qelizave.
Çfarë është kultura e qelizave sekondare?
Siç përshkruhet më sipër, kur qelizat në kulturat ngjitëse zënë të gjithë substratin e disponueshëm ose kur qelizat në kulturat e suspensionit tejkalojnë kapacitetin e mediumit për të mbështetur rritjen e mëtejshme, përhapja e qelizave fillon të zvogëlohet ose të pushojë plotësisht. Për të ruajtur densitetin optimal të qelizave për rritjen e vazhdueshme dhe për të stimuluar përhapjen e mëtejshme, kultura primare duhet të nënkulturohet. Ky proces njihet si kultura e qelizave sekondare.
Gjatë kulturës së qelizave dytësore, qelizat nga kultura parësore transferohen në një enë të re me mjedis të freskët të rritjes. Procesi përfshin heqjen e mediave të mëparshme të rritjes dhe shkëputjen e qelizave të ngjitura në kulturat primare aderuese. Kultivimi sekondar i qelizave kërkohet në mënyrë periodike për t'u siguruar qelizave hapësirë në rritje dhe lëndë ushqyese të freskëta, duke zgjatur kështu jetën e qelizave dhe duke zgjeruar një numër qelizash në kulturë.
Kultivimi sekondar i një vëllimi të caktuar të një kulture parësore në një vëllim të barabartë të mjedisit të ri të rritjes lejon mirëmbajtjen afatgjatë të linjave qelizore. Kultivimi sekondar në një vëllim më të madh të mediumit të freskët të rritjes praktikohet për të rritur numrin e qelizave, për shembull në proceset industriale ose eksperimentet shkencore.
Cili është ndryshimi midis kulturës së qelizave primare dhe kulturës sekondare të qelizave?
Siç i kemi kuptuar tani të dy termat veç e veç, do t'i krahasojmë të dy në mënyrë që të gjejmë dallime të tjera midis tyre.
Kur të përdoret kultura primare dhe/ose sekondare e qelizave
Kjo varet nga ajo që dëshironi të mësoni dhe çfarë lloj eksperimenti kryeni.
Kultura primare e qelizave: Ky është procesi që duhet përdorur për të kultivuar qelizat nga indi prindëror në fjalë. Qelizat në kulturën parësore do të kenë një jetëgjatësi të kufizuar për shkak të shterimit të substratit dhe lëndëve ushqyese dhe grumbullimit të toksinave, me rritjen e popullsisë. Kultura primare, pavarësisht teknikave të ndarjes të përdorura në procesin e izolimit, mund të përmbajë disa lloje qelizash. Megjithatë, ky mund të mos jetë problem në të gjitha llojet e eksperimenteve dhe në raste të tilla mund të përdoret vetëm kultura primare.
Kultura sekondare e qelizave: Zakonisht, numri i qelizave të marra nga kultura parësore është i pamjaftueshëm në eksperimente. Kultura e qelizave sekondare jep mundësinë e zgjerimit të popullatës qelizore dhe gjithashtu zgjatjen e jetëgjatësisë. Ai mundëson përzgjedhjen e mëtejshme të qelizave me përdorimin e një mjedisi selektiv dhe lejon uniformitetin gjenotipik dhe fenotipik në popullatë. Ky proces përdoret për të gjeneruar kultura të përsëritura për karakterizimin, ruajtjen dhe eksperimentimin bazë.
ngjashmëri me indin prindëror
Kultura primare e qelizave: Qelizat për kulturën primare të qelizave merren drejtpërdrejt nga një ind i kafshëve ose bimëve. Prandaj, qelizat në kulturën parësore ngjajnë shumë me indin e saj prindëror dhe në përputhje me rrethanat, përgjigja biologjike mund të jetë më afër një situate in vivo sesa ajo e një kulture qelizore dytësore.
Kultura sekondare e qelizave: Kultura e qelizave sekondare e ka origjinën nga një kulturë qelizore parësore. Megjithëse nënkulturimi zgjat jetëgjatësinë e qelizave, ekziston mundësia që pas disa fazave, qelizat të transformohen ose të humbasin kontrollin e mos ndarjes më shumë se një sasi të caktuar herë. Kjo mund të jetë për shkak të mutacioneve ose ndryshimeve gjenetike në qelizat primare gjatë nënkulturimit. Për shembull, disa mikroorganizma priren të përshtaten me kushtet e kulturës, e cila është kryesisht e ndryshme nga mjedisi i tyre natyror, duke ndryshuar biologjinë e tyre.
Procesi i kultivimit – Marrja e qelizave
Kultura primare e qelizave: Në kulturën primare të qelizave, indet e kafshëve ose bimëve do të kalojnë nëpër faza të shpëlarjes, diseksionit dhe zbërthimit mekanik ose enzimatik. Indi i ndarë do të përmbajë një sërë llojesh të ndryshme qelizash dhe kjo mund të kërkojë adoptimin e një teknike të ndarjes në mënyrë që të izolohen qelizat me interes.
Kultura sekondare e qelizave: Në kulturën sekondare të qelizave, nëse kultura parësore është një kulturë ngjitëse, hapi i parë është shkëputja e qelizave nga bashkëngjitja (sipërfaqja e enës së kulturës) me mjete mekanike ose enzimatike. Më pas, qelizat duhet të shkëputen nga njëra-tjetra për të formuar një pezullim të vetëm qelizor.
Numri i qelizave në kulturë
Kultura primare e qelizave: Nuk është e dëshirueshme që të kemi një suspension absolut njëqelizor, pasi shumë qeliza parësore mbijetojnë më mirë në grupime të vogla.
Kultura sekondare e qelizave: Mjafton të gjenerohet një pezullim i vetëm qelizor.
Jetgjatësia e kulturës
Kultura primare e qelizave: Kulturat primare të qelizave kanë jetëgjatësi të kufizuar. Siç u shpjegua më lart, kjo ndodh sepse rritja e qelizave shter substratin dhe lëndët ushqyese dhe çon në akumulimin e metabolitëve toksikë. Si rezultat, gradualisht ritmi i rritjes së qelizave bie, duke çuar në vdekjen e qelizave.
Kultivimi sekondar i qelizave: Kultura sekondare e qelizave zgjat jetëgjatësinë e qelizave. Nënkulturimi periodik mund të prodhojë qeliza të pavdekshme nëpërmjet transformimit ose ndryshimit gjenetik të qelizave primare.
Rreziku i kontaminimit
Kultura primare e qelizave: Kulturat primare të qelizave janë më të vështira për t'u kujdesur. Në përgjithësi, kulturat primare të qelizave kanë nevojë për një përzierje të pasur të aminoacideve, mikronutrientëve, disa hormoneve dhe faktorëve të rritjes. Si rezultat, rreziku i kontaminimit në kulturat qelizore primare është më i lartë se kulturat e qelizave sekondare.
Kultura sekondare e qelizave: Kulturat e qelizave sekondare janë relativisht të lehta për t'u mirëmbajtur dhe rreziku i kontaminimit është më i ulët se kulturat e qelizave primare.
Në këtë artikull, ne jemi përpjekur të kuptojmë termat kulturë qelizore primare dhe kulturë qelizore sekondare e ndjekur nga një krahasim për të nxjerrë në pah dallimet kryesore midis tyre. Dallimi themelor qëndron në mënyrën se si qelizat rrjedhin nga kultura; qelizat për kulturën e qelizave primare merren drejtpërdrejt nga një ind i kafshëve ose bimëve, ndërsa qelizat për kulturën e qelizave dytësore merren nga një kulturë primare tashmë e krijuar.
