Dallimi kryesor – Njolla gram kundrejt acidit të shpejtë
Bakteret janë mikroorganizma shumë të vegjël. Ato janë transparente dhe zbulimi i tyre është i vështirë në kushte jetese dhe të panjollosura. Kështu, zhvillohen metoda të ndryshme ngjyrosjeje për të lehtësuar zbulimin e baktereve. Ekzistojnë tre lloje kryesore të teknikave të ngjyrosjes: ngjyrosje e thjeshtë, ngjyrosje diferenciale dhe ngjyrosje strukturore. Ngjyrosja diferenciale është një teknikë e cila përdor më shumë se një njollë për të diferencuar bakteret. Njolla gram dhe njolla acid-fast njihen më gjerësisht si njolla diferenciale. Ngjyrosja gram është një teknikë e ngjyrosjes diferenciale, e cila ndan bakteret në dy grupe të njohura si bakteret gram-pozitive dhe bakteret gram-negative. Ngjyrosja acid-fast është një njollë diferenciale që përdoret për të identifikuar organizmat acid-fast si Mycobacterium nga organizmat joacid të shpejtë. Ky është ndryshimi kryesor midis njollës Gram dhe njollës Acid Fast.
Çfarë është Gram Stain?
Ngjyrosja me gram është një teknikë e rëndësishme e ngjyrosjes diferenciale që përdoret për identifikimin e baktereve në mikrobiologji. Kjo teknikë u prezantua nga bakteriologu danez Hans Christian Gram në 1884. Ngjyrosja me gram i kategorizon bakteret në dy grupe të mëdha të quajtura gram pozitive dhe gram negative, të cilat janë shumë të rëndësishme në klasifikimin dhe identifikimin e baktereve. Mikrobiologët kryejnë ngjyrosje gram si një hap fillestar në karakterizimin bakterial gjatë studimeve të tyre.
Bakteret grupohen në bazë të dallimeve në murin e tyre qelizor. Bakteret gram pozitive përbëhen nga një shtresë e trashë peptidoglikane në murin e tyre qelizor ndërsa bakteret gram negative përbëhen nga një shtresë e hollë peptidoglikane në murin e tyre qelizor. Rezultati i ngjyrosjes me gram do të bazohet në ndryshimin në trashësinë e shtresës peptidoglikane të murit qelizor.
Ngjyrosja me gram kryhet duke përdorur katër reagentë të ndryshëm përkatësisht; njollë primare, mordant, agjent zbardhues dhe kundërnjollë. Kristal violet dhe safranin përdoren si njolla primare dhe kundër, respektivisht, gram jod dhe alkool 95% përdoren respektivisht si mordant dhe dekolorues. Hapat bazë të ngjyrosjes me gramë janë si më poshtë;
- Një njollë bakteriale përgatitet në një rrëshqitje xhami të pastër, fiksohet me nxehtësi dhe ftohet.
- Ngjyrosja përmbytet me kristal vjollce për 1 – 2 minuta.
- Smear shpëlahet me ujë të ngad altë rubineti për të hequr njollat e tepërta.
- Gramë jod aplikohet në njollë për 1 minutë.
- Smear shpëlahet me ujë të ngad altë rubineti
- Smear lahet me 95% alkool për 2 – 5 sekonda dhe shpëlahet me ujë të ngad altë rubineti.
- Ngjyroset kundër lyerjes me safranin për 1 minutë
- Smear shpëlahet me ujë të ngad altë të rubinetit, thahet dhe vëzhgohet nën mikroskop.
Në fund të ngjyrosjes gram, bakteret gram negative do të vërehen në ngjyrë rozë, ndërsa bakteret gram pozitive do të vërehen në ngjyrë vjollce.
Figura 01: Bakteret gram negative dhe gram pozitive
Rezultati i njollës me gram vendoset nga trashësia e shtresës së peptidoglikanit në murin e tyre qelizor. Gjatë hapit të çngjyrosjes, njolla primare dhe mordanti hiqen lehtësisht nga bakteret gram negative dhe bëhen të pangjyrë pasi kanë një shtresë të hollë peptidoglikane. Njolla kryesore ruhet në bakteret gram pozitive pasi ato kanë një shtresë të trashë peptidoglikane. Njolla kundër njollës nuk do të jetë efektive për bakteret gram pozitive për shkak të mbajtjes së njollës parësore. Kështu, bakteret gram pozitive do të jenë të dukshme në ngjyrën primare të njollës, pra ngjyrën vjollcë. Njolla kundër do të njollosë bakteret gram negative dhe ato do të jenë të dukshme në ngjyrën e pickimit, që është ngjyra e safranit. Prandaj, është e lehtë të kategorizohen bakteret në dy grupe sipas ngjyrosjes gram dhe është e vlefshme në diferencimin dhe identifikimin e baktereve.
Çfarë është Acid Fast?
Acid-qëndrueshmëria është një veti fizike e baktereve të caktuara, veçanërisht rezistenca e tyre ndaj çngjyrosjes nga acidet gjatë procedurave të ngjyrosjes. Pasi të njollosen, këta organizma i rezistojnë procedurave të zbërthimit të acidit të holluar dhe ose etanolit, të zakonshme në shumë protokolle të ngjyrosjes. Kështu, emri 'acid fast' u jepet atyre organizmave. Kjo veti tregohet për shkak të nivelit të lartë të materialit dylli (acidet mikolike) në muret e tyre qelizore. Ky test është kritik për identifikimin e Mycobacterium tuberculosis.
Figura 2: Mikobakteret e shpejta acidike
Kjo njollë e shpejtë acide u zhvillua nga Paul Ehrlich në 1882. Teknika e shpejtë e acidit Ehrlich u modifikua nga Ziehl-Neelsen dhe tani përdoret më shpesh. Procedura e ngjyrosjes së shpejtë me acid përfshin tre reagentë të ndryshëm. Karbol fuschin përdoret si njollë kryesore. Alkooli acid përdoret si agjent dekolorues. Blu metilen përdoret si njollë kundër. Procedura e ngjyrosjes kryhet si më poshtë.
- Njolla kryesore (karbol fuchsin) aplikohet në ekzemplarin e fiksuar në rrëshqitje (Të gjitha qelizat do të ngjyrosen me ngjyrë të kuqe).
- Slide nxehet me avull për 5 minuta, gjë që i fut njollat në qeliza siç duhet.
- Më pas shtohet solucioni çngjyrues (Kjo heq bojën e kuqe nga të gjitha qelizat, përveç baktereve acid fast).
- Blu metilen shtohet si kundërnjollë (Ngjyron të gjitha qelizat bakteriale të çngjyrosura).
- Bakteret e shpejta acidike mbeten të kuqe ndërsa bakteret e shpejta joacidike njollosen në blu.
Cilat janë ngjashmëritë midis Njollës Gram dhe Acid Fast?
- Ngjyrosja me gram dhe Acid fast janë dy teknika të ngjyrosjes diferenciale.
- Të dyja teknikat i kategorizojnë bakteret në dy grupe.
- Të dyja teknikat përdorin dy njolla dhe një çngjyrosje.
Cili është ndryshimi midis Njollës Gram dhe Acid Fast?
Njollë Gram vs Acid Fast |
|
| Ngjyrosja me gram është një teknikë e ngjyrosjes diferenciale, e cila i ndan bakteret në dy grupe bakteret gram-pozitive dhe bakteret gram-negative. | Ngjyrosja Acid Fast është një njollë diferenciale që përdoret për të identifikuar organizmat acid-fast nga organizmat jo acid të shpejtë. |
| Njolla parësore | |
| Crystal violet është njolla kryesore e përdorur zakonisht në ngjyrosjen me gram. | Fuchsin Carbol është njolla kryesore që përdoret në acid fast. |
| Agjent dekolorues | |
| 95% alkool përdoret si një agjent zbardhues në njollat gram. | Alkooli acid përdoret si një agjent dekolorues në acidin fast. |
| Counter Stain | |
| Njolla gram përdor safranin si kundërnjollë. | Njolla e shpejtë acid përdor blu metilenin si kundërnjollë. |
| Vëzhgim | |
| Bakteret gram-negative vërehen në ngjyrën e vjollcës dhe bakteret gram pozitive vërehen në ngjyrën vjollcë. | Bakteret Acid Fast janë vërejtur në ngjyrë të kuqe dhe bakteret jo acid fast janë vërejtur në ngjyrë blu. |
Përmbledhje – Njolla Gram kundrejt Acid Fast
Vizualizimi i mikroorganizmave në gjendje të gjallë është i vështirë. Prandaj, njollat biologjike dhe procedurat e ngjyrosjes përdoren gjerësisht për të studiuar vetitë e tyre. Ngjyrosja diferenciale është një lloj teknikë e ngjyrosjes që përdoret për të diferencuar bakteret. Ngjyrosja me gram dhe ngjyrosja e shpejtë me acid janë dy teknika të ngjyrosjes diferenciale. Ngjyrosja gram dallon bakteret gram negative dhe bakteret gram pozitive bazuar në trashësinë e mureve të tyre qelizore. Ngjyrosja e shpejtë me acid diferencon bakteret acide të shpejta nga bakteret jo acide të shpejta bazuar në përmbajtjen e acidit mikolik në murin qelizor. Ky është ndryshimi midis njollës së shpejtë me acid dhe njollës me gramë.
Shkarko versionin PDF të Gram Stain vs Acid Fast
Mund të shkarkoni versionin PDF të këtij artikulli dhe ta përdorni për qëllime jashtë linje sipas shënimit të citimit. Ju lutemi shkarkoni versionin PDF këtu Dallimi midis Njollës Gram dhe Acidit të Shpejtë.
