Dallimi kryesor – Gram Stain vs Kultura
Ngjyrosja Gram është një teknikë ngjyrosjeje e cila kryhet për të diferencuar bakteret në dy grupe sipas trashësisë së shtresës peptidoglikane në murin e tyre qelizor. Kultura është një metodë e rritjes dhe mbajtjes së mikroorganizmave në kushte laboratorike për analiza të ndryshme. Dallimi kryesor midis njollës me gram dhe kulturës është funksioni i tyre; tendosje gram një teknikë e ngjyrosjes së baktereve ku kultura është një metodë e rritjes dhe mbajtjes së mikroorganizmave.
Çfarë është Gram Stain?
Ngjyrosja me gram është një teknikë e rëndësishme e ngjyrosjes diferenciale që përdoret për identifikimin e baktereve në Mikrobiologji. Kjo teknikë u prezantua nga bakteriologu danez Hans Christian Gram në 1884. Ngjyrosja me gram i kategorizon bakteret në dy grupe të mëdha: gram pozitive dhe gram negative; këto janë shumë të rëndësishme në klasifikimin dhe identifikimin e baktereve. Ngjyrosja gram kryhet si hap fillestar për karakterizimin bakterial.
Bakteret grupohen në bazë të dallimeve në murin e tyre qelizor. Bakteret gram pozitive përmbajnë një shtresë të trashë peptidoglikani në murin e tyre qelizor, ndërsa bakteret gram negative përmbajnë një shtresë të hollë peptidoglikane në murin e tyre qelizor siç tregohet në figurën 01. Rezultati i ngjyrosjes gram do të bazohet në ndryshimin e trashësisë në shtresën peptidoglikane të muri qelizor.
Figura 1: Bakteret gram pozitive dhe bakteret gram negative
Ngjyrosja me gram kryhet duke përdorur katër reagentë të ndryshëm përkatësisht; njollë primare, mordant, agjent zbardhues dhe kundërnjollë. Kristal violet dhe safranin shërbejnë si njolla primare dhe kundër, përkatësisht, ndërsa gram jod dhe 95% alkool shërbejnë respektivisht si zbutës dhe dekolorues.
Hapat bazë të ngjyrosjes me gramë
- Një njollë bakteriale përgatitet në një rrëshqitje xhami të pastër, fiksohet me nxehtësi dhe ftohet.
- Ngjyrosja përmbytet me kristal vjollce për 1 – 2 minuta.
- Smear shpëlahet me ujë të ngad altë rubineti për të hequr njollat e tepërta.
- Gramë jod aplikohet në njollë për 1 minutë.
- Smear shpëlahet me ujë të ngad altë rubineti
- Smear lahet me 95% alkool për 2 – 5 sekonda dhe shpëlahet me ujë të ngad altë rubineti.
- Ngjyroset kundër lyerjes me safranin për 1 minutë
- Smear shpëlahet me ujë të ngad altë të rubinetit, thahet dhe vëzhgohet nën mikroskop.
Në fund të ngjyrosjes gram, bakteret gram negative do të vërehen në ngjyrë rozë ndërsa bakteret gram pozitive do të vërehen në ngjyrë vjollcë siç tregohet në figurën 02. Rezultati i njollës me gram vendoset nga trashësia të shtresës peptidoglikane në murin e tyre qelizor. Gjatë hapit të çngjyrosjes, njolla primare dhe mordanti hiqen lehtësisht nga bakteret gram negative dhe bëhen të pangjyrë pasi kanë një shtresë të hollë peptidoglikane. Njolla kryesore ruhet në bakteret gram pozitive pasi ato kanë një shtresë të trashë peptidoglikani. Njolla kundër njollës nuk do të jetë efektive për bakteret gram pozitive për shkak të mbajtjes së njollës parësore. Pra, bakteret gram pozitive do të jenë të dukshme në ngjyrën primare të njollës, d.m.th., ngjyrën vjollcë. Njolla kundër njollës do të njollosë bakteret gram negative dhe do të jetë e dukshme në ngjyrën e pickimit që është ngjyra e safranit. Prandaj, është e lehtë të kategorizohen bakteret në dy grupe sipas njollës gram dhe është e vlefshme në diferencimin dhe identifikimin e baktereve.
Figura 2: Sforcimi i Gramit
Çfarë është kultura?
Kultura mikrobike është një metodë e kultivimit dhe mbajtjes së mikroorganizmave në kushte laboratorike për qëllime të ndryshme. Kulturat rriten në mjedise të ngurta, gjysmë të ngurta dhe të lëngëta bazuar në llojin dhe qëllimin e kultivimit të mikroorganizmave. Kulturat pajisen me lëndët ushqyese të nevojshme dhe kushtet e rritjes që kërkohen nga mikroorganizmat. Ka përbërës të ndryshëm të një mjedisi kulture si burimi i energjisë, burimi i karbonit, burimi i azotit, mineralet, mikronutrientët, uji, agjenti ngurtësues, etj. Temperatura optimale, oksigjeni dhe pH duhet të rregullohen sipas llojit të mikroorganizmit të rritur.
Ka lloje të ndryshme kulturash mikrobike; për shembull, kultura e grumbullit, kultura e vazhdueshme, kultura me thikë, kultura e pllakave të agarit, kultura e lëngut, etj. Sipas përbërjes së mjedisit të rritjes, ekzistojnë lloje të ndryshme të mediave të kulturës të njohura si media sintetike, media gjysmë sintetike dhe media natyrore. Kulturat mikrobike përgatiten në kushte sterile brenda një dhome të veçantë të quajtur rrjedhje laminare e ajrit. Mjeti i rritjes dhe enët e qelqit sterilizohen përpara inokulimit të mikroorganizmit të dëshiruar. Në kushte të përshtatshme sterile, mikroorganizmi i synuar transferohet në mediumin ushqyes të sterilizuar dhe inkubohet në temperaturën optimale. Brenda mjedisit, mikroorganizmat do të rriten dhe do të shumohen duke përdorur lëndët ushqyese të ofruara.
Figura 3: Një kulturë bakteriale në pjatë
Cili është ndryshimi midis Gram Stain dhe Kulturës?
Njollë Gram vs Kulturë |
|
| Sforcimi Grams është një teknikë e ngjyrosjes diferenciale që përdoret për diferencimin dhe identifikimin e baktereve. | Kultivimi mikrobial është një metodë e rritjes së mikroorganizmave në laborator. |
| Përbërësit | |
| Kjo përdor reagentë të ndryshëm duke përfshirë dy njolla. | Kjo përdor mediume të ndryshme kulture si mjedise të ngurta, gjysmë të ngurta dhe të lëngshme të përbëra nga lëndë ushqyese dhe kushte të tjera të nevojshme. |
| Funksionet bazë | |
| Kjo lejon grupimin e baktereve në dy grupe: gram negativ dhe gram pozitiv. | Kjo lejon shumëzimin e mikroorganizmave për qëllime të ndryshme. |
| Baza | |
| Rezultati i ngjyrosjes Gram bazohet në ndryshimet në shtresën e peptidoglikanit të murit qelizor. | Mikroorganizmat do të rriten dhe do të shumohen brenda mjedisit të kulturës. |
| Rezultati | |
| Bakteret gram negative janë të dukshme në ngjyrë rozë dhe bakteret gram pozitive janë të dukshme në ngjyrë vjollcë. | Në pjata, mund të shihen koloni të mikroorganizmave. Në mjediset e lëngëta, mikroorganizmat janë në formë të pezulluar. |
Përmbledhje – Gram Stain vs Culture
Kulturat mikrobike përgatiten dhe mirëmbahen në kushte laboratorike për qëllime të ndryshme si ruajtje, testim, pastrim kimik, etj. Ngjyrosja me gram është një procedurë ngjyrosjeje e cila i diferencon bakteret në dy grupe kryesore të quajtura baktere gram negative dhe baktere gram pozitive. Prandaj, ndryshimi midis ngjyrosjes me gram dhe kulturës është se njolla me gram është një teknikë e ngjyrosjes së baktereve ndërsa kultura është një metodë e rritjes dhe mbajtjes së mikroorganizmave në laboratorë.
