Dallimi kryesor – Transformantët vs Rekombinantët
Rikombinimi dhe transformimi janë dy hapa thelbësorë në inxhinierinë gjenetike, ku karakteristikat e një organizmi modifikohen qëllimisht duke manipuluar materialin e tij gjenetik. Rekombinimi është një proces në të cilin ADN-ja e huaj përfshihet në një gjenom vektori dhe formohet molekula rekombinante e ADN-së. Transformimi është hapi tjetër në të cilin molekula rekombinante futet në organizmin pritës. Qeliza pritëse ose organizmi lehtëson shprehjen e molekulës rekombinante. Dallimi kryesor midis transformantëve dhe rekombinantëve është se transformatorët janë qelizat ose organizmat që marrin molekulën rekombinante brenda dhe lehtësojnë shprehjen ndërsa rekombinantët janë vektorët që lejojnë futjen e ADN-së së huaj në gjenomin e saj dhe transportin në transformatorët bujtës për shprehje.
Çfarë janë transformatorët?
Transformuesit janë qelizat ose organizmat në të cilët ADN-ja rekombinante merret për shprehje. Bakteret zakonisht përdoren si organizma pritës në inxhinierinë gjenetike pasi ato rriten, shumohen dhe trajtohen lehtë në kushte laboratorike dhe procesi i transformimit është i lehtë në krahasim me organizmat e tjerë. Bakteri pritës më i njohur i përdorur në inxhinierinë gjenetike është bakteri E coli.
Gjatë procesit të transformimit, qelizat strehuese nxiten të marrin rekombinantët. Megjithatë, disa qeliza bujtëse nuk marrin molekula rekombinante. Ato njihen si jotransformante dhe qelizat që përmbajnë molekula rekombinante të ADN-së brenda njihen si transformues. Përzgjedhja e transformantëve nga jotransformantët bëhet duke përdorur shënues të përzgjedhshëm në biologjinë molekulare. Markuesit e përzgjedhshëm futen në gjenomën e vektorit së bashku me insertin e ADN-së. Markuesit e përzgjedhshëm të përdorur zakonisht janë gjenet rezistente ndaj antibiotikëve. Gjenet shënues lehtësojnë diferencimin e transformantëve dhe vazhdojnë procesin. Pas procesit të transformimit, bakteri rritet në një mjedis që përmban antibiotikë. Vetëm transformatorët janë të aftë të rriten në atë mjedis pasi ata kanë rekombinantët brenda.
Pasi transformohet molekula e ADN-së rekombinante brenda organizmit pritës, ADN-ja e huaj ose mund të integrohet në gjenomën e qelizës pritëse ose të mbetet e paintegruar në citoplazmë. Megjithatë, shprehja dhe riprodhimi i ADN-së së huaj ndodhin në organizmin pritës dhe prodhojnë rezultatin e dëshiruar nga procesi.
Çfarë janë rekombinantët?
Një rekombinant është një organizëm ose një qelizë që posedon gjenom të rikombinuar që përmban ADN të huaj. Rekombinantët janë rezultat i procesit të inxhinierisë gjenetike. Ato janë ndërtuar artificialisht in vitro duke futur gjenet me interes dhe duke modifikuar gjenomin. Shpesh plazmidet bakteriale dhe bakteriofagët veprojnë si rekombinantë në inxhinierinë gjenetike. Ka kimera të ADN-ve të ndryshme. Molekula e ADN-së rekombinante mbart ADN-në e huaj në organizmin pritës dhe e bën atë të shprehë dhe të formojë produktin e dëshiruar.
Molekulat rekombinante ndërtohen duke përdorur endonukleaza restriktive dhe ligaza të ADN-së. Fragmenti i dëshiruar i ADN-së ndahet nga organizmi origjinal dhe futet në vektor për të bërë rekombinantin për transformim. Prerja e gjenit me interes dhe hapja e organizmit vektor duhet të bëhet duke përdorur të njëjtën enzimë kufizuese për të krijuar skaje ngjitëse të pajtueshme për t'i bashkuar ato së bashku. Pasi ADN-ja e huaj të përfshihet në gjenomën vektoriale, ajo njihet si molekula e ADN-së rekombinante ose rekombinante.
Figura 02: ADN rekombinante
Cili është ndryshimi midis Transformantëve dhe Rekombinantëve?
Transformantët vs Rekombinantët |
|
| Transformantët janë qelizat që kanë brenda molekulën e ADN-së rekombinante. | Rekombinantët janë molekulat bartëse që kanë ADN-në e huaj të futur në gjenomin e vet. |
| Shprehja e ADN-së së huaj | |
| Ato janë qelizat pritëse që janë në gjendje të shprehin ADN-në rekombinante. | Ata duhet të jenë në gjendje të vetë-përsëriten brenda organizmit pritës. |
| Zgjedhja | |
| Qelizat që mund të rriten dhe shumohen lehtësisht zgjidhen si qeliza pritëse. | Ato duhet të jenë lehtësisht të nxjerrshme dhe duhet të përmbajnë shënues të përzgjedhshëm. |
Përmbledhje – Transformantët vs Rekombinantët
Transformuesit janë qelizat ose organizmat me molekula rekombinante të ADN-së brenda tyre. Rekombinantët janë organizmat ose qelizat që kanë pësuar rikombinim gjenetik dhe kanë ADN të huaj brenda gjenomit të tyre. Qelizat bakteriale përdoren shpesh si qeliza pritëse për transformim dhe plazmidet dhe bakterofagët përdoren shpesh si vektorë në teknologjinë e ADN-së rekombinuese. Ky është ndryshimi midis transformantëve dhe rekombinantëve.
