Elektroforezë vs Elektroosmozë
Metodat e ndarjes fizike si filtrimi, distilimi, kromatografia në kolonë nuk janë metoda të lehta kur bëhet fjalë për ndarjen e disa molekulave. Elektroforeza dhe elektro-osmoza janë dy teknika të tjera të ndarjes që mund të përdoren për të ndarë grimcat e ngarkuara.
Çfarë është Elektroforeza?
Elektroforeza është një teknikë e ndarjes së molekulave bazuar në madhësitë e tyre. Themelore për këtë ndarje është ngarkesa e molekulës dhe aftësia e tyre për të lëvizur në një fushë elektrike. Kjo është teknika më e zakonshme dhe kryesore në biologjinë molekulare për të ndarë molekulat, veçanërisht ADN-në dhe proteinat. Kjo është kryesisht në përdorim sepse është relativisht e lehtë dhe e lirë. Aparati për elektroforezë mund të jetë pak i komplikuar dhe përgatitja e tij kërkon pak kohë. Por ne mund të bëjmë lehtësisht një aparat elektroforezë nga gjërat që kemi në laborator. Teknikat e elektroforezës mund të ndryshojnë në varësi të qëllimeve tona. Ne mund të përdorim elektroforezën njëdimensionale për ndarjen e ADN-së ose proteinës. Elektroforeza dydimensionale përdoret kur kërkohen mostra më të zgjidhura (si në rastin e shtypjes së gishtave). Një xhel përdoret si medium mbështetës për të ndarë molekulat. Ky xhel mund të përgatitet si fletë të sheshta ose në tuba. Baza e kësaj procedure është ndarja e molekulave në varësi të shkallës së lëvizjes së tyre nëpër një xhel kur furnizohet një fushë elektrike. Molekulat e ngarkuara negativisht si ADN-ja priren të udhëtojnë drejt polit pozitiv në këtë fushë elektrike ndërsa molekulat e ngarkuara pozitivisht priren të udhëtojnë në polin negativ. Dy lloje xhelësh përdoren në elektroforezë si agarozë dhe poliakrilamide. Këta të dy kanë fuqi të ndryshme zgjidhëse. Xhel vepron si një sitë për të filtruar madhësitë e ndryshme të molekulave. Ngarkesat elektrostatike të vendosura në xhel veprojnë si forcë.
Ndarja varet nga lëvizshmëria e joneve.
F=fv=ZeE
V=ZeE/ f
F=forca që vepron mbi një grimcë
f=koeficienti i fërkimit
V=shpejtësia mesatare e migrimit
Z=ngarkesa e grimcës migruese
e=tarifë elementare
E=forca e fushës elektrike
Kushtet e nevojshme për elektroforezën janë relativisht të thjeshta. Gjatë bërjes së xhelit dhe ekzekutimit të mostrës, përdoret një tampon. Markuesit dhe ngjyrat përdoren për qëllime vizualizimi.
Çfarë është elektro-osmoza?
Ky është procesi i lëvizjes së një lëngu përmes një materiali duke përdorur një fushë elektrike të aplikuar. Lëvizja mund të bëhet përmes një materiali poroz, përgjatë një kapilar, membrane etj. Kjo mund të përdoret si një teknikë e ndarjes (veçanërisht elektro-osmoza kapilare). Shpejtësia e lëngut është në proporcion linear me fushën elektrike të aplikuar. Gjithashtu varet nga materiali i përdorur për ndërtimin e kanalit dhe zgjidhja e përdorur. Në ndërfaqe, tretësira dhe materiali kanë marrë ngarkesa të kundërta dhe, kjo njihet si një shtresë elektrike e dyfishtë. Kur një fushë elektrike aplikohet në tretësirë, shtresa elektrike e dyfishtë lëviz nga forca Kulomb që rezulton. Kjo njihet si rrjedha elektro-osmotike.
Cili është ndryshimi midis elektroforezës dhe elektro-osmozës?
• Në elektroforezë, grimcat e ngurta (makromolekulat si acidet nukleike ose proteinat) lëvizen duke përdorur një fushë elektrike. Por në elektro-osmozë një lëng po lëviz.
• Në elektroforezë, materiali i fortë mbështetës është një xhel. Por ajo elektro-osmozë mund të jetë një xhel, membranë, kapilar, etj.
