Dallimi kryesor midis elektroporimit dhe mikroinjektimit është se elektroporimi është një teknikë që përdor një puls elektrik të tensionit të lartë për të dhënë ADN në qelizat pritëse ndërsa mikroinjektimi është një teknikë që përdor një gjilpërë qelqi me majë të imët ose mikropipetë për të shpërndarë ADN-në në qelizat pritëse.
Transformimi është procesi me të cilin ADN-ja e huaj transferohet në qelizat pritëse. Me transformim, përbërja gjenetike e organizmit mund të ndryshohet. Ekzistojnë metoda të ndryshme të transformimit kimik, biologjik dhe fizik. Disa janë metoda direkte, ndërsa disa janë metoda indirekte. Elektroporimi dhe mikroinjektimi janë dy metoda fizike të cilat janë metoda të transformimit të drejtpërdrejtë. Elektroporimi përdor një fushë elektrike për të nxitur poret mikroskopike në membranat qelizore biologjike në mënyrë që të inkorporojë ADN-në në qelizat pritëse. Mikroinjektimi, nga ana tjetër, jep drejtpërdrejt ADN-në duke përdorur një mikropipetë ose gjilpërë xhami me majë të imët.
Çfarë është Elektroporimi?
Electroporation është një teknikë transformimi që shpërndan ADN-në në qelizat bimore dhe protoplastet. Kjo teknikë përdor një impuls elektrik të tensionit të lartë. Materialet bimore inkubohen në një tretësirë tampon me ADN. Pastaj tretësira i nënshtrohet një impulsi elektrik të tensionit të lartë. Poret e shkaktuara nga tensioni i lartë krijohen në membranat qelizore të bimëve dhe përmes këtyre poreve, ADN migron brenda qelizave dhe integrohet me ADN-në gjenomike të bimëve. Efikasiteti i kësaj metode varet nga materialet bimore dhe kushtet e trajtimit.
Figura 01: Elektroporation
Kur transformimi bëhet duke përdorur elektroporimin, vetëm 40 deri në 50 % e qelizave marrin ADN. Për më tepër, vetëm 50% e qelizave të transformuara mund të mbijetojnë me këtë metodë. Megjithatë, kjo metodë është e lehtë për t'u kryer dhe nuk ndryshon strukturën ose funksionin biologjik të qelizave. Për më tepër, mund të përdoret për një gamë të gjerë qelizash.
Çfarë është Microinjection?
Mikroinjeksioni është një teknikë transformimi e cila është veçanërisht e dobishme kur futet ADN në qeliza të mëdha. Kjo metodë përdor një gjilpërë qelqi me majë të imët ose një mikropipetë për të shpërndarë ADN-në në protoplastet e bimëve ose qelizat e kafshëve (ovocitet, vezët dhe embrionet). Në fakt, kjo metodë është më e përshtatshme për të bërë kafshë transgjenike si minjtë. Në këtë metodë, ADN-ja inkorporohet drejtpërdrejt në bërthamë ose në citoplazmë.
Ngjashëm me elektroporimin, mikroinjeksioni është një teknikë e transformimit të drejtpërdrejtë. Mikroinjektimi kryhet nën një konfigurim të specializuar të mikroskopit. Kontrolli i kompjuterizuar i mbajtjes së pipetës, gjilpërës, skenës së mikroskopit dhe teknologjisë video ka rritur efikasitetin e kësaj teknike. Gjatë injektimit të ADN-së, një ngjyrë mund të përdoret për të identifikuar lehtësisht qelizat e transformuara. Prandaj, nuk ka nevojë të përdoret një metodë e veçantë për të identifikuar qelizat e transformuara. Më e rëndësishmja, procedura e mikroinjektimit nuk kërkon një gjen shënues.
Figura 02: Mikroinjeksion
Për më tepër, kjo metodë është shumë efektive dhe e riprodhueshme. Megjithatë, kjo metodë është e kushtueshme, kërkon kohë dhe kërkon një person të aftë. Gjithashtu, vetëm një numër i vogël qelizash mund të trajtohen me këtë metodë.
Cilat janë ngjashmëritë midis elektroporimit dhe mikroinjektimit?
- Edhe elektroporimi dhe mikroinjektimi janë dy lloje teknikash transformimi.
- Këto metoda shpërndajnë ADN-në në qelizat bimore dhe protoplastet.
- Janë metoda të drejtpërdrejta.
- Për më tepër, ato janë metoda fizike ose mekanike.
- Të dyja metodat janë të dobishme kur prodhohen bimë dhe kafshë transgjenike.
Cili është ndryshimi midis elektroporimit dhe mikroinjektimit?
Teknika e elektroporimit përdor një fushë elektrike për të futur ADN-në ndërsa teknika e mikroinjektimit është një mikropipetë ose një gjilpërë xhami me majë të imët për të futur ADN-në. Kështu, ky është ndryshimi kryesor midis elektroporimit dhe mikroinjektimit. Për më tepër, elektroporimi përdoret kryesisht për qelizat bimore dhe protoplastet ndërsa mikroinjeksioni përdoret kryesisht për qelizat shtazore. Përveç kësaj, elektroporimi nuk kërkon aq kohë sa mikroinjektimi.
Infografia e mëposhtme përmbledh ndryshimet midis elektroporimit dhe mikroinjektimit në formë tabelare.
Përmbledhje – Elektroporimi kundrejt mikroinjeksionit
Elektroporimi dhe mikroinjektimi janë dy metoda fizike të transferimit të gjeneve. Elektroporimi përdor një fushë elektrike të tensionit të lartë ndërsa mikroinjeksioni përdor një gjilpërë xhami ose mikropipetë. Kështu, ky është ndryshimi kryesor midis elektroporimit dhe mikroinjektimit. Megjithatë, të dyja metodat futin drejtpërdrejt ADN-në ekzogjene në qelizat pritëse.
