Dallimi kryesor midis HPLC fazës së kundërt dhe fazës normale është se faza e kundërt HPLC përdor një fazë stacionare jopolare dhe një fazë të lëvizshme polare ndërsa faza normale HPLC përdor një fazë stacionare polare dhe një fazë të lëvizshme më pak polare.
HPLC e fazës normale është teknika më e vjetër e HPLC që Tswett përdori në ndarjet e tij të ekstrakteve bimore; ai përdori shkumës në një kolonë xhami. Kjo ishte mënyra klasike e kromatografisë që çoi në emërtimin e saj si teknika "normale". HPLC me fazë të kundërt, nga ana tjetër, është e kundërta e teknikës normale, të cilën shkencëtarët e zhvilluan kohët e fundit.
Çfarë është HPLC me fazë të kundërt?
HPLC e fazës së kundërt është një teknikë kromatografike në të cilën ne përdorim një fazë stacionare hidrofobike. Ndër të gjitha metodat HPLC, ne e përdorim këtë metodë për rreth 70% për shkak të zbatueshmërisë së saj të gjerë dhe riprodhueshmërisë. Faza e palëvizshme është jopolare dhe faza e lëvizshme është polare.
Shumicën e rasteve, shkencëtarët përdorin një përzierje ujore të ujit me një tretës organik të përzier, polar, si acetonitrili ose metanoli si fazë lëvizëse. Prandaj, analitet ndërveprojnë me fazën stacionare jopolare.
Çfarë është HPLC me fazë normale?
HPLC e fazës normale është një teknikë kromatografike në të cilën ne përdorim një fazë stacionare hidrofile. Është metoda tradicionale e HPLC, megjithëse ne nuk e përdorim aq shumë. Faza e palëvizshme është polare, dhe faza e lëvizshme është jopolare. Më e rëndësishmja, faza e lëvizshme e kësaj teknike është 100% organike. Do të thotë që nuk përdoret ujë për këtë.
Figura 01: Një profil mostër për kromatogramet HPLC të fazës normale dhe të kundërt sipas polaritetit të përbërësve në analit.
Në mënyrë tipike, faza stacionare përmban silicë, ciano, diol, faza të lidhura amino, etj. Fazat e lëvizshme përfshijnë tretës organikë si heksani, acetati etil etj. Kjo teknikë bazohet në mbajtjen e molekulave të tretësit ose të analitit në faza stacionare polare.
Cili është ndryshimi midis fazës së kundërt dhe fazës normale HPLC?
HPLC e fazës së kundërt është një teknikë kromatografike në të cilën ne përdorim një fazë stacionare hidrofobike. Faza stacionare e kësaj teknike është jopolare ndërsa faza e lëvizshme është polare. Për më tepër, shkencëtarët përdorin një përzierje ujore të ujit me një tretës organik të përzier, polar, të tillë si acetonitrili ose metanoli si fazë e lëvizshme në fazën e kundërt HPLC. Në të kundërt, HPLC e fazës normale është një teknikë kromatografike në të cilën ne përdorim një fazë stacionare hidrofile. Faza stacionare e kësaj teknike është polare ndërsa faza e lëvizshme është jopolare. Përveç kësaj, shkencëtarët përdorin tretës organikë si heksan, acetat etilik, etj. si fazë të lëvizshme të fazës normale HPLC. Infografia e mëposhtme paraqet ndryshimin midis HPLC fazës së kundërt dhe fazës normale në një formë tabelare.
Përmbledhje – Faza e kundërt kundrejt Fazës Normale HPLC
Teknikat HPLC të fazës së kundërt dhe fazës normale janë dy teknika kromatografike të lëngshme. Dallimi kryesor midis HPLC fazës së kundërt dhe fazës normale është se faza e kundërt HPLC përdor një fazë stacionare jopolare dhe një fazë të lëvizshme polare ndërsa faza normale HPLC përdor një fazë stacionare polare dhe një fazë të lëvizshme më pak polare.
