Dallimi kryesor midis HPLC dhe HPLC-së së shpejtë është se presioni i pompës që përdorim për HPLC është rreth 40 MPa ndërsa presioni i pompës për HPLC të shpejtë është rreth 3-5 MPa.
Teknika më e zakonshme që përdorim për ndarjen e përbërësve të një përzierjeje është "kromatografia e lëngshme". Ka disa teknika për të arritur këtë qëllim, nga të cilat HPLC është shumë popullor. HPLC do të thotë Kromatografi e lëngshme me performancë të lartë që identifikon, përcakton dhe ndan përbërësit e një përzierjeje të lëngshme në një mënyrë të shpejtë dhe efikase. Fast HPLC është një aplikim i veçantë i HPLC i cili kohët e fundit ka tërhequr vëmendjen e atyre që janë të përfshirë në studimin e zgjidhjeve.
Çfarë është HPLC?
HPLC është kromatografi e lëngshme me performancë të lartë. Ai përdor një presion të lartë për të shtyrë tretësit në mënyrë që ata të kalojnë nëpër një kolonë. Gjithashtu, është një mënyrë ideale për të ndarë dhe studiuar përbërës të ndryshëm si aminoacidet, acidet nukleike, karbohidratet, steroidet, antibiotikët dhe hidrokarburet. HPLC ka shumë përparësi ndaj metodave të tjera të ndarjes së përzierjeve si rezolucion më i lartë dhe analizë më e shpejtë. Zhduk nevojën për ripaketim dhe rigjenerim dhe ofron kontroll më të mirë mbi parametrat dhe në këtë mënyrë, rrit efikasitetin e ndarjes. Në mënyrë ideale, HPLC përshtatet për aplikime në shkallë të gjerë pasi mund të ndajë grimca shumë të vogla dhe lejon përdorimin e presioneve të larta që e bëjnë të lehtë që tretësit të rrjedhin lehtësisht.
Figura 01: Kolona HPLC
Me pak fjalë, metoda e funksionimit të teknikës HPLC është si më poshtë. Së pari, ne duhet të futim kampionin në rrjedhën e fazës së lëvizshme në sasi të vogla diskrete duke përdorur një pompë. Presioni i pompës duhet të mbahet në 40 MPa. Kjo rrjedhë e fazës së lëvizshme depërton nëpër kolonën e HPLC. Pastaj, komponentët në mostër gjithashtu kalojnë nëpër kolonë. Megjithatë, shpejtësitë e tyre të lëvizjes ndryshojnë nga njëra-tjetra për shkak të ndryshimit në ndërveprimet midis përbërësve të mostrës dhe adsorbentit brenda kolonës. Ne e quajmë këtë adsorbent si fazë stacionare sepse ai qëndron brenda kolonës (nuk lëviz). Më pas, në fund të kolonës, ne mund të mbledhim kampionin që del nga kolona, në këtë mënyrë, ne mund të mbledhim përbërësit në kampion veç e veç.
Çfarë është Fast HPLC?
Kohët e fundit, shkencëtarët hulumtues në institutin kërkimor Schering Plow zhvilluan një teknikë të shpejtë HPLC që është një version i avancuar i HPLC pasi lejon ndarjen edhe më të shpejtë të përbërjeve nga një përzierje. Gjithashtu, e njohur si HPLC e shpejtë, kjo teknikë përdor një grimca silicë me bërthamë të shkrirë 2.7um që janë krijuar duke shkrirë silicë poroze 0.5um mbi një grimcë të ngurtë silicë. Këto grimca të krijuara në mënyrë unike e bëjnë procedurën e ndarjes shumë të shpejtë dhe atë gjithashtu me presion të ulët prapa sesa ajo që përdorim në HPLC.
Figura 02: Aparati FPLC
HPLC e shpejtë merr rezultate të krahasueshme me UPLC, por shkencëtarët konsiderojnë se kjo teknikë është superiore pasi nuk kërkon pajisje shumë të shtrenjta me presion ultra të lartë. Ajo që është e mrekullueshme është se HPLC e shpejtë nuk kërkon ndonjë protokoll të ri laboratorik.
Cili është ndryshimi midis HPLC dhe HPLC të shpejtë?
HPLC është kromatografi e lëngshme me performancë të lartë dhe HPLC e shpejtë është një formë e avancuar e kromatografisë së lëngshme me performancë të lartë. Dallimi kryesor midis HPLC dhe HPLC i shpejtë është se presioni i pompës që përdorim për HPLC është rreth 40 MPa. Ndërsa, presioni i pompës për HPLC të shpejtë është rreth 3-5 MPa. Për më tepër, ne mund të veçojmë komponime të ndryshme si aminoacidet, acidet nukleike, karbohidratet, steroidet, antibiotikët dhe hidrokarburet duke përdorur teknikën HPLC ndërsa teknika e shpejtë HPLC përdoret kryesisht për ndarjen e proteinave.
Infografia e mëposhtme paraqet më shumë informacion mbi ndryshimin midis HPLC dhe HPLC të shpejtë.
Përmbledhje – HPLC vs HPLC e shpejtë
HPLC është një teknikë e kromatografisë së lëngshme që është bërë shumë e njohur në të gjithë botën. Fast HPLC është një version i ri i HPLC, shkencëtarët hulumtues në Institutin Schering Plow zhvilluan këtë teknikë të re. Dallimi kryesor midis HPLC dhe HPLC i shpejtë qëndron në presionin e pompës që përdorim për ndarjen. Kjo eshte; presioni i pompës që përdorim për HPLC është rreth 40 MPa. Por, presioni i pompës për HPLC të shpejtë është rreth 3-5 MPa.
