Transformim vs Transfeksion
Transformimi dhe transfeksioni janë dy teknika të thjeshta që përdoren për të futur një gjen të huaj në një qelizë bujtëse. Megjithatë, këto teknika varen nga lloji i sistemeve strehuese ose vektoriale.
Çfarë është Transformimi i Qelizës?
Transformimi është teknika e përdorur për të futur gjenet në maja dhe qelizat bakteriale. Kjo teknikë zakonisht shkakton ndryshime të trashëgueshme në gjene, dhe kështu shprehja e gjenit është e përhershme. Transformimi bakterial u prezantua për herë të parë në 1928 nga Frederick Griffith. Më pas, në fillim të viteve 1970, kjo teknikë u përdor në E.coli. Gjatë procesit të transformimit të E. coli, qelizat zhyten në tretësirë të ftohtë të CaCl2 Ky hap i bën qelizat E.coli kompetente. Pas kësaj, qelizat kompetente përzihen me ADN-në plazmide dhe inkubohen në akull për 20-30 min. Më pas jepet një goditje e shkurtër termike në mënyrë që të mundësohet transferimi i ADN-së në qelizë. Së fundi, qelizat vendosen në një supë me lëndë ushqyese dhe inkubohen në 37 °C për 60-90 minuta në mënyrë që të krijohen plazmidet. Pasi këto hapa të përfundojnë me sukses, qelizat e transformuara mund të vendosen në një media të përshtatshme për përhapjen e qelizave. Duke qenë se transformimi konsiderohet si një teknikë joefikase, nuk mund të përdoret për përgatitjen e bankave klonore.
Çfarë është Transfeksioni Qelizor?
Transfeksioni është një metodë e futjes së një gjeni të huaj, zakonisht, në qelizat e gjitarëve. Ekzistojnë dy metoda të transfektimit; domethënë, transfeksioni kalimtar dhe transfeksioni i qëndrueshëm. Në transfeksionin kalimtar, shprehja e gjenit është e disponueshme për një kohë të kufizuar; kështu, ndryshimi i gjenit shkakton shprehje të përkohshme. Kjo metodë e transfektimit është e thjeshtë dhe e shpejtë; prandaj mund të përdoret në mënyrë rutinore. Një pengesë e transfeksionit kalimtar është vështirësia e aplikimit për sistemet e sintezës së proteinave në shkallë të gjerë.
Gjatë transfeksionit të qëndrueshëm, një gjen i synuar integrohet në gjenomën e qelizës pritëse, dhe kështu shprehja e gjenit është e përhershme, ndryshe nga transfeksioni kalimtar.
Cili është ndryshimi midis Transformimit dhe Transfeksionit?
• Transformimi është futja e një gjeni në një qelizë prokariote (bakteriale dhe maja), ndërsa transfeksioni zakonisht quhet futja e një gjeni në një qelizë gjitari.
• Transformimi rezulton në ndryshim të trashëgueshëm në gjene, ndërsa transfeksioni mund të rezultojë në shprehje të përkohshme ose ndryshime të përhershme në gjene.
