Diferenca kryesore – RPMI vs DMEM
Shumica e studimeve kërkimore përfshijnë kultivimin e qelizave shtazore dhe kështu, këto studime kërkojnë mirëmbajtjen e linjave qelizore të kafshëve në kushte të veçanta të rritjes. Kultivimi i qelizave shtazore kryhet gjerësisht në studimet farmakologjike për të identifikuar metabolizmin e barnave, në diagnostikimin e sëmundjeve dhe në kërkimin e kancerit. Media e kulturës qelizore është një aspekt i rëndësishëm i kulturës së qelizave shtazore. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) dhe Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) janë dy mjedise kulture të përdorura në kultivimin e qelizave shtazore. RPMI është një medium i përdorur gjerësisht për të kultivuar qelizat e gjitarëve në kulturë suspensioni. DMEM është një lloj i modifikuar i mediumit bazal, me përqendrime të rritura të aminoacideve dhe vitaminave deri në katërfish. DMEM përdoret në kultivimin e qelizave në kulturat ngjitëse. Dallimi kryesor midis dy mediave është lloji i kulturës së medias. RPMI përdoret në kulturat pezulluese, ndërsa DMEM përdoret për kultivimin e qelizave ngjitëse.
Çfarë është RPMI?
RPMI ose Roswell Park Memorial Institute Medium referohet gjithashtu si RPMI 1640. Emri i medias është nxjerrë nga instituti në të cilin u zbulua media. Ky medium përdoret zakonisht në kulturën e qelizave shtazore, veçanërisht për rritjen e qelizave të gjitarëve. Ato fillimisht u zhvilluan për të rritur limfocite njerëzore.
Përbërësit e mëposhtëm përfshihen në RPMI.
- Glukozë
- tregues pH (e kuqe fenol)\
- Kripërat (klorur natriumi, bikarbonat natriumi, fosfat dinatriumi, klorur kaliumi, sulfat magnezi dhe nitrat kalciumi)
- Amino acide
- Vitamina (i-inositol, klorur kolinë, acid para-aminobenzoik, acid folik, nikotinamid, hidroklorur piridoksinë, hidroklorur tiaminë, pantotenat kalciumi, biotinë dhe riboflavinë, cianokobalaminë)
Karakteristika e veçantë e RPMI është rritja e përqendrimit të fosfatit në mjedis. RPMI përdoret në një atmosferë 5% dioksid karboni. Kjo do të sigurojë kushtet maksimale dhe optimale për rritjen e qelizave. PH i medias mbahet në 8.0 nga sistemi buferik i bikarbonateve.
Figura 01: Kultura e qelizave në një pjatë Petri
Zbatimet e RPMI në kultivimin e qelizave
- Kultivimi i limfociteve T dhe B të njeriut, qelizave të palcës kockore dhe hibridomës.
- Përdoret për të studiuar qelizat neoplazike të njeriut.
Çfarë është DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) është një medium i modifikuar që përgatitet komercialisht. Tekstura origjinale e pluhurit mesatar është e verdhë. Në DMEM, përqendrimi i vitaminës rritet deri në katërfish, duke rritur kështu përmbajtjen e lëndëve ushqyese në mjedis.
DMEM modifikohet gjithashtu duke shtuar më shumë kripëra si nitrat ferrik, piruvat natriumi dhe disa aminoacide jo thelbësore si serina dhe glicina. Formulimi i glukozës në media është gjithashtu i ndryshuar. Formulimi origjinal përbëhet nga 1000 mg/L glukozë, ndërsa në DMEM, përqendrimi rritet deri në 4500 mg/L. DMEM gjithashtu kërkon plotësim të një mediumi serumi pasi nuk është një medium i plotë. Më shpesh, DMEM plotësohet me Serum fetusi të gjedhit (FBS). FBS siguron proteinat e nevojshme dhe faktorët e rritjes për procesin e kultivimit.
PH e mediumit ndryshon me shtimin e bikarbonatit të natriumit. pH e mediumit para se të shtoni bikarbonat natriumi është rreth 6.80 – 7.40, ndërsa pH pas shtimit të bikarbonatit të natriumit është në intervalin 7.60 – 8.20. Temperatura e ruajtjes së mediumit është 2 – 8 0C.
Figura 02: DMEM
Aplikimet e DMEM
- Për të studiuar aftësinë formuese të pllakave të poliomavirusit në qelizat embrionale të miut.
- Në studimet e frenimit të kontaktit.
- Në hulumtimin dhe analizën e kulturave të qelizave të pulës.
Cilat janë ngjashmëritë midis RPMI dhe DMEM?
- Si RPMI dhe DMEM përdoren në kulturën e qelizave shtazore.
- Të dyja mediat RPMI dhe DMEM janë formulime të lëngshme.
- Të dy mediat RPMI dhe DMEM përmbajnë aminoacidet thelbësore, vitaminat dhe kripërat inorganike të nevojshme për rritjen.
- Të dyja mediat RPMI dhe DMEM janë të paplota. Prandaj, serumi duhet shtuar.
- Të dyja mediat RPMI dhe DMEM përdorin glukozën si burimin e saj të karbonit.
- Të dyja mediat RPMI dhe DMEM kanë një pH më të lartë.
Cili është ndryshimi midis RPMI dhe DMEM?
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI është një mjedis i përdorur gjerësisht për të kultivuar qelizat e gjitarëve në një kulturë suspensioni. | DMEM është një lloj i modifikuar i mediumit bazal me përqendrime të rritura të aminoacideve dhe vitaminave. |
| Prania e fosfateve ekstra | |
| Prezant në RPMI. | Mungon në DMEM. |
| Përdore | |
|
Përdoret për kultivimin e qelizave në kulturat ngjitëse. Është mësuar,
|
| Llojet e kulturës | |
| RPMI përdoret për kulturat e pezullimit. | DMEM përdoret për kulturat me qeliza të ngjitura. |
Përmbledhje – RPMI vs DMEM
Të dy RPMI dhe DMEM përdoren gjerësisht në kultivimin e qelizave shtazore, veçanërisht për kultivimin e linjave qelizore të kafshëve duke përfshirë limfocitet in vitro. DMEM është një mjedis bazal i modifikuar ku ka një përqendrim të rritur të lëndëve ushqyese. RPMI i zhvilluar nga Roswell Park Memorial Institute, dhe është gjithashtu një medium i përdorur në kultivimin e qelizave shtazore veçanërisht për limfocitet e gjitarëve. Të dyja mediat janë të disponueshme në treg. Ky është ndryshimi midis RPMI dhe DMEM.
