Dallimi kryesor – Imunofluoreshenca vs imunohistokimi
Diagnostifikimi i sëmundjeve, i cili përdor metoda biologjike molekulare, është bërë një fushë në zhvillim e teknologjisë laboratorike klinike. Ai përfshin të gjitha testet dhe metodat për të identifikuar një sëmundje dhe për të kuptuar shkakun e një sëmundjeje duke analizuar ADN-në, ARN-në ose proteinat e shprehura në një organizëm. Përparimet e shpejta në diagnostikimin molekular kanë mundësuar kërkime bazë mbi sëmundjet ngjitëse dhe jo të transmetueshme. Këto përdoren për të përcaktuar ndryshimet në sekuencën ose nivelet e shprehjes në gjenet ose proteinat vendimtare të përfshira në sëmundje. Imunofluoreshenca (IF) dhe imunohistokimia (IHC) janë dy teknika të tilla të përdorura gjerësisht në biologjinë e kancerit. IF është një lloj IHC ku përdoret një metodë e zbulimit të fluoreshencës për të analizuar antitrupat monoklonal dhe poliklonal, ndërsa IHC përdor metoda të bazuara kimike për të zbuluar antitrupat monoklonal dhe poliklonal. Ky është ndryshimi kryesor midis IF dhe IHC.
Çfarë është imunofluoreshenca (IF)?
Imunofluoreshenca është një teknikë zbulimi ku antitrupat e përdorur në analizë etiketohen duke përdorur ngjyra fluoreshente ose proteina fluoreshente për qëllimin e zbulimit. Antitrupat dytësorë të etiketuar mund të rezultojnë në sinjale të padëshiruara të sfondit; Prandaj, teknika IF bazohet në etiketimin e vetë antitrupit primar aktualisht për të shmangur sinjalet e padëshiruara gjatë zbulimit. Nëpërmjet kësaj teknike, lidhja jo-specifike midis antitrupit parësor dhe dytësor parandalohet dhe është më e shpejtë pasi nuk ka asnjë hap të inkubacionit dytësor. Cilësia e të dhënave është përmirësuar gjithashtu.
Figura 01: Ngjyrosje me imunofluoreshencë të dyfishtë për BrdU, NeuN dhe GFAP
Fluorokromet ose ngjyrat fluoreshente janë përbërës që mund të thithin rrezatimin, mundësisht rrezatimin ultravjollcë që ngacmohet. Kur grimcat arrijnë në gjendjen bazë nga gjendja e ngacmuar, ato lëshojnë rrezatim i cili kapet dhe zbulohet nga një detektor për të formuar një spektër. Është me rëndësi të madhe që etiketa fluoreshente të jetë e përputhshme dhe e qëndrueshme për reaksionin e caktuar dhe duhet të konjugohet siç duhet me antitrupin për të marrë rezultate të sakta. Një nga fluorokromet më të përdorura është izotiocianati i fluoresceinës (FITC), i cili është me ngjyrë të gjelbër, me gjatësi vale të pikut të absorbimit dhe emetimit përkatësisht 490 nm dhe 520 nm. Rodamina, një agjent tjetër i përdorur në IF, ka ngjyrë të kuqe dhe ka gjatësi vale të dallueshme të absorbimit dhe emetimit prej 553 nm dhe 627 nm.
Çfarë është imunohistokimia (IHC)?
IHC është një metodë testimi molekulare e praktikuar për të identifikuar dhe konfirmuar praninë e antigjenit në qelizën e synuar. Qeliza e synuar mund të jetë një grimcë infektive, një patogjen mikrobial ose një qelizë tumorale malinje. IHC përdor antitrupa monoklonale dhe poliklonale për të përcaktuar praninë e antigjeneve të pranishëm në sipërfaqen qelizore të qelizave të synuara. Teknika bazohet në lidhjen antigjen-antitrup. Një shënues zbulimi është i lidhur me këto antitrupa për të zbuluar praninë ose mungesën e antigjenit të veçantë. Këta shënues mund të jenë shënues kimikë të tillë si enzimat, antitrupat me etiketë fluoreshente ose antitrupa të etiketuar me radio.
Figura 02: Fetë e trurit të miut e ngjyrosur nga imunohistokimi
Zbatimi më i popullarizuar i IHC është në biologjinë e qelizave kancerogjene për të identifikuar praninë e tumoreve malinje, por përdoret gjithashtu për zbulimin e sëmundjeve infektive.
Cilat janë ngjashmëritë midis imunofluoreshencës dhe imunohistokimisë?
- Imunofluoreshenca dhe imunohistokimia zhvillohen në kushte in vitro.
- Të dyja teknikat bazohen në antigjen-antitrupin
- Të dyja janë teknika shumë të shpejta.
- Rezultatet e teknikave janë të riprodhueshme.
- Të dyja kanë përmirësuar cilësinë e të dhënave.
- Këto teknika përdoren në diagnostikimin e kancerit dhe sëmundjeve infektive.
Cili është ndryshimi midis imunofluoreshencës dhe imunohistokimisë?
Imunofluoreshenca vs imunohistokimi |
|
| IF është një teknikë zbulimi ku antitrupat e përdorur në analizë etiketohen duke përdorur ngjyra fluoreshente ose proteina fluoreshente për zbulim. | IHC është një teknikë zbulimi ku antitrupat e përdorur në analizë etiketohen duke përdorur kimikate ose elementë radioaktivë për zbulim. |
| Saktësi | |
| Saktësia është më e lartë në teknikën IF në krahasim me IHC. | Saktësia është më e ulët në IHC. |
| Specifikiteti | |
| IF është më specifike. | IHC është më pak specifike. |
Përmbledhje - Imunofluoreshenca vs imunohistokimi
Mekanizmat molekularë kanë sjellë shumë ndryshime në fushën e mjekësisë, duke krijuar metoda të avancuara të testimit molekular, të cilat kanë sjellë revolucione në fushën e diagnostikimit. Këto shpikje kanë çuar në një identifikim dhe konfirmim të shpejtë dhe të saktë të sëmundjes, duke mundësuar kështu administrimin dhe prodhimin e suksesshëm të barnave. Këto teknika përdoren gjithashtu në farmakologji për të gjetur objektivat e barnave dhe për të konfirmuar vetitë farmakokinetike të barit gjatë metabolizmit të barit. IF dhe IHC janë dy metoda diagnostikuese që bazohen në konceptin e lidhjes së antigjenit dhe antitrupave, megjithëse mënyra e zbulimit në të dyja teknikat ndryshon. IF përdor parimin e fluoreshencës për të zbuluar antigjenin dhe IHC përdor konceptin e konjugimit kimik për të zbuluar antigjenin. Ky është ndryshimi midis IF dhe IHC.
Shkarko versionin PDF të imunofluoreshencës vs imunohistokimisë
Mund të shkarkoni versionin PDF të këtij artikulli dhe ta përdorni për qëllime jashtë linje sipas shënimit të citimit. Ju lutemi shkarkoni versionin PDF këtu Dallimi midis imunofluoreshencës dhe imunohistokimisë.
