Dallimi kryesor – Imunocitokimi vs imunohistokimi
Imunocitokimia (ICC) dhe Imunohistokimia (IHC) janë dy teknika të përdorura gjerësisht në diagnostikimin molekular, të cilat identifikojnë dhe konfirmojnë shfaqjen e sëmundjeve jo të transmetueshme dhe të sëmundjeve ngjitëse bazuar në shënuesit molekularë të pranishëm në qeliza. Dallimi kryesor i imunocitokimisë dhe imunohistokimisë është molekula që përdoret si procedurë e analizës në këto teknika. Në ICC, përdoren antitrupa parësorë dhe sekondarë të konjuguar me shënues të tillë si fluoreshenca, ndërsa IHC, antitrupa monoklonale dhe poliklonale përdoren për përcaktimet diagnostike.
Çfarë është imunocitokimia (ICC)?
ICC përdor antitrupa parësorë dhe sekondarë të lidhur me shënuesit si shënuesit fluoreshentë ose enzimat dhe është një metodë e fuqishme zbulimi për të zbuluar antigjenet e pranishme në qelizat e synuara të cilat mund të jenë ose grimca qelizore infektive ose qeliza tumorale kanceroze. Për imunocitokiminë kërkohen tre lloje kontrollesh.
- Antrupi primar – kontroll që tregon specifikën e antitrupit primar që lidhet me antigjenin
- Antrupi sekondar – kontroll që tregon se etiketa është specifike për antitrupin primar
- Kontrollet e etiketës – tregoni se etiketimi është rezultat i etiketës së shtuar dhe jo rezultat i etiketimit endogjen.
Figura 01: Imunocitokimia etiketon proteinat individuale brenda qelizave (këtu, tirozin hidroksilaza në aksonet e neuroneve autonome simpatike tregohen me ngjyrë të gjelbër).
Kontrolli primar i antitrupave është specifik për çdo antitrup të ri dhe nuk mund të përsëritet për çdo eksperiment. Kontrolli dytësor i antitrupave është projektuar bazuar në antitrupin primar të përdorur në eksperiment dhe përfshihet në çdo eksperiment. Kontrolli i etiketimit përfshihet nëse një kusht i procedurës është ndryshuar, mostra është ndryshuar ose kur gjendet etiketim i papritur.
Dy aplikimet kryesore të ICC janë Radio Immuno – Assay (RIA) dhe Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Antitrupi më i zakonshëm i përdorur është imunoglobulina G.
Çfarë është imunohistokimia (IHC)?
Në imunohistokiminë, kampioni burimor përmban antitrupa monoklonale dhe poliklonale për të përcaktuar praninë e antigjeneve në qelizat e huaja. Kjo teknikë bazohet në reagimin specifik të lidhjes antigjen-antitrup. Antitrupat e përdorur në zbulimin mund të etiketohen me shënues të ndryshëm; mund të jenë shënues fluoreshence, shënues të etiketuar me radio ose shënues kimikë. Nëpërmjet lehtësimit të lidhjes in vitro ndërmjet antigjenit dhe antitrupit të synuar, mund të përcaktohet prania ose mungesa e një proteine të caktuar të një qelize.
Figura 02: Ngjyrosje imunohistokimike e veshkave normale me CD10
Aktualisht, shkencëtarët janë të përfshirë në zhvillimin e antitrupave të synuar për antigjenet specifike të pranishme në qeliza që mund të zhvillohen ose si qeliza tumorale malinje ose antigjene të pranishme në agjentë infektivë si HIV.
Cilat janë ngjashmëritë midis imunocitokimisë dhe imunohistokimisë?
- Reagimet janë shumë specifike dhe të sakta në ICC dhe IHC.
- Zbatimet e ICC dhe IHC përfshijnë diagnostikimin e kancerit dhe sëmundjeve infektive.
- Kushtet sterile duhet të mbahen në të dyja kushtet dhe ato duhet të kryhen in vitro
- Të dyja teknikat ofrojnë rezultate të riprodhueshme.
- Të dyja janë të shpejta.
- Etiketimi i radios, teknikat e fluoreshencës përdoren si metoda zbulimi si në ICC ashtu edhe në IHC.
- Të dyja bazohen në çiftimin antigjen-antitrup.
Cili është ndryshimi midis imunocitokimisë dhe imunohistokimisë?
Imunocitokimi (ICC) vs Imunohistokimi (IHC) |
|
ICC përdor shënues parësor dhe dytësor të lidhur me antitrupat, si shënuesit fluoreshente ose enzimat dhe është një metodë e fuqishme zbulimi për të zbuluar antigjenet e pranishme në qelizat e synuara. | IHC është një metodë që përdor antitrupa monoklonale dhe poliklonale për të përcaktuar praninë e antigjeneve të cilët janë shënues të veçantë proteinash të vendosur në sipërfaqet qelizore. |
Sample Source | |
Kampionet e marra nga indet që janë përpunuar histologjikisht në seksione të holla përdoren në ICC. | IHC përdor mostra që përbëhen nga qeliza të rritura në një shtresë të vetme ose qeliza në suspension të cilat depozitohen në një rrëshqitje. |
Përpunimi i mostrës | |
Në ICC, qelizat duhet të jenë të përshkueshme për të lehtësuar depërtimin e antitrupave në objektivat ndërqelizorë. | Në IHC, qelizat fiksohen me formalinë, futen në parafinë përpara ngjyrosjes. |
Përmbledhje – Imunocitokimi vs Imunohistokimi
Diagnostifikimi molekular përdoret për të identifikuar dhe konfirmuar shfaqjen e sëmundjeve jotransmetuese dhe të sëmundjeve ngjitëse bazuar në shënuesit molekularë të pranishëm në qeliza. Markuesit molekularë mund të jenë proteina ose sekuenca të ADN-së ose ARN-së; zhvillimi i teknologjive si ICC dhe IHC kanë hapur rrugën që shkencëtarët të identifikojnë sëmundjen dhe shkakun e saj në një fazë të hershme. Si ICC ashtu edhe IHC varen nga reaksionet specifike midis antitrupave dhe antigjenit edhe pse burimi i mostrës. Dallimi kryesor midis imunocitokimisë dhe imunohistokimisë është përpunimi i mostrës së dy procedurave.
Shkarko versionin PDF të imunocitokimisë vs imunohistokimisë
Mund të shkarkoni versionin PDF të këtij artikulli dhe ta përdorni për qëllime jashtë linje sipas shënimit të citimit. Ju lutemi shkarkoni versionin PDF këtu Dallimi midis imunocitokimisë dhe imunohistokimisë.