Dallimi kryesor midis imunofluoreshencës direkte dhe indirekte është se imunofluoreshenca direkte përdor një antitrup të vetëm që punon kundër objektivit të interesit ndërsa imunofluoreshenca indirekte përdor dy antitrupa për të etiketuar objektivin e interesit.
Imunofluoreshenca ose imazhi i qelizave është një teknikë që përdoret për të etiketuar një antigjen specifik të synuar me një fluorofore. Këtu, fluorofori është një përbërje kimike fluoreshente që mund të ri-emetojë dritë pas ngacmimit të dritës. Kur një fluorofor lidhet me antigjenin e synuar, ai lejon zbulimin e molekulës së synuar në mostër. Për ta përshkruar më tej, kur një antigjen lidhet me një antitrup specifik, ai mund të konjugohet me fluorofore. Prandaj, është e lehtë të zbulohet prania e antigjenit të synuar në mostër kur vëzhgohet nën mikroskopin fluoreshent.
Përveç kësaj, ekzistojnë dy lloje imunofluoreshence; imunofluoreshencë direkte dhe indirekte. Dallimi midis imunofluoreshencës direkte dhe indirekte qëndron kryesisht në numrin e antitrupave të përdorur dhe në konjugimin e fluoroforit. Kjo do të thotë, në imunofluoreshencën direkte, fluorofori konjugohet drejtpërdrejt me antitrupin primar ndërsa në imunofluoreshencën indirekte, fluorofori konjugohet me antitrupin dytësor.
Çfarë është imunofluoreshenca direkte?
Imunofluoreshenca përdor antitrupa për të zbuluar antigjenet specifike të synuara. Imunofluoreshenca e drejtpërdrejtë është një nga dy llojet e imunofluoreshencës. Në imunofluoreshencën e drejtpërdrejtë, një antitrup i vetëm (antitrup primar) përfshin dhe fluorofori konjugohet drejtpërdrejt me antitrupin primar. Pas lidhjes së antitrupit me antigjenin e synuar, fluorofori lëshon fluoreshencë e cila mund të zbulohet nga një mikroskop fluoreshent.
Figura 01: Imunofluoreshencë direkte
Megjithatë, imunofluoreshenca e drejtpërdrejtë është një metodë e shtrenjtë pasi antitrupat parësorë të konjuguar janë të kushtueshëm në krahasim me antitrupat dytësorë. Megjithatë, ai nuk përfshin një hap shtesë, pra një teknikë më të shkurtër. Për më tepër, lidhjet jo specifike reduktohen në imunofluoreshencën direkte. Prandaj, ndër-reaktiviteti i specieve është i ulët. Por në zbulim, ndjeshmëria e imunofluoreshencës direkte është e dobët në krahasim me imunofluoreshencën indirekte.
Çfarë është imunofluoreshenca indirekte?
Imunofluoreshenca indirekte është lloji i dytë i imunofluoreshencës që përfshin dy lloje antitrupash si antitrupat parësorë dhe sekondarë në etiketimin e antigjenit të synuar. Në këtë metodë, fluorofori bashkohet me antitrupin dytësor. Prandaj, kjo teknikë përfshin një hap shtesë.
Figura 02: Imunofluoreshenca
Megjithatë, ndjeshmëria është e lartë në këtë metodë pasi disa fluorofore mund të konjugohen me antitrupa dytësorë dhe kjo e bën më të lehtë zbulimin. Për më tepër, imunofluoreshenca indirekte është më pak e shtrenjtë për shkak të faktit se konjugimi i antitrupave sekondarë është më pak i kushtueshëm dhe më i lehtë. Në krahasim me imunofluoreshencën direkte, ndër-reaktiviteti i specieve është i lartë në metodën indirekte.
Cilat janë ngjashmëritë ndërmjet imunofluoreshencës direkte dhe indirekte?
- Janë dy lloje të teknikës së imunofluoreshencës.
- Antrupat primare dhe fluorofori përfshijnë në të dyja metodat.
- Gjithashtu, reaksioni antigjen-antitrup ndodh në të dyja metodat.
- Për më tepër, imunofluoreshenca direkte dhe indirekte përdorin një mikroskop fluoreshence për zbulimin e antigjenit.
Cili është ndryshimi midis imunofluoreshencës direkte dhe indirekte?
Imunofluoreshenca mund të jetë direkte ose indirekte bazuar në konjugimin e fluoroforit me antitrupat e përdorur. Në imunofluoreshencën direkte, fluorofori konjugohet me antitrupin primar, i cili është antitrupi i vetëm që përfshin këtë teknikë. Në ndryshim nga kjo, në imunofluoreshencën indirekte, fluorofori konjugohet me antitrupin dytësor, i cili është një nga dy llojet e antitrupave që përfshihen në teknikë. Prandaj, ndryshimi kryesor midis imunofluoreshencës direkte dhe indirekte është lloji i antitrupave që bashkohet me fluoroforin.
Infografia e mëposhtme ofron një krahasim krah për krah të ndryshimit midis imunofluoreshencës direkte dhe indirekte.
Përmbledhje – Imunofluoreshencë direkte kundër indirekte
Imunofluoreshenca është një teknikë që përdoret për të zbuluar praninë e antigjeneve specifike në një kampion. Kjo teknikë përdor antitrupa specifikë. Prandaj, në këtë, antitrupat bashkohen me fluorofore për t'i zbuluar ato duke përdorur një mikroskop fluoreshent. Për më tepër, ekzistojnë dy lloje të imunofluoreshencës, përkatësisht, imunofluoreshenca direkte dhe indirekte. Imunofluoreshenca e drejtpërdrejtë përfshin një antitrup të vetëm dhe fluorofor të konjuguar drejtpërdrejt me këtë antitrup. Imunofluoreshenca indirekte përfshin dy antitrupa; primare dhe sekondare dhe fluorofore e konjuguar me antitrupin sekondar. Meqenëse disa antitrupa sekondarë mund të lidhen me një antitrup primar dhe disa fluorofore mund të bashkohen me antitrupa dytësorë, imunofluoreshenca indirekte është një metodë më e ndjeshme sesa metoda e drejtpërdrejtë. Për më tepër, metoda indirekte është më pak e shtrenjtë se metoda e drejtpërdrejtë. Kështu, ky është ndryshimi midis imunofluoreshencës direkte dhe indirekte.
