Dallimi kryesor midis analizës së mikronukleusit dhe kometës është se analiza e mikronukleusit është e rëndësishme për të kontrolluar dëmtimet kromozomale si pasojë e ekspozimit të mutagjenit, ndërsa analiza e kometës është e rëndësishme për të zbuluar dëmtimin parësor të ADN-së në qelizat individuale.
Analizat e gjenotoksicitetit ndihmojnë në vlerësimin e mundësive të mutacioneve dhe anomalive kromozomale. Genotoksinat përfshijnë substanca kimike dhe rrezatim. Kancerogjenët, mutagjenët dhe teratogjenët janë kategoritë kryesore të gjenotoksinave. Ato shkaktojnë dëmtime të ndryshme si mutacione pikësore, delecione, thyerje të vetme dhe të dyfishta, aberacione kromozomale, formime mikrobërthamash, riparim të ADN-së dhe ndërveprime të ciklit qelizor. Gjendje të tilla mund të çojnë në një shumëllojshmëri të gjerë sëmundjesh dhe analizat e gjenotoksicitetit parandalojnë dëmtimin e mundshëm nga këto kushte. Analiza e mikronukleusit dhe analiza e kometës janë dy teknika nën analizat e gjenotoksicitetit.
Çfarë është Analiza e Micronucleus?
Anali i mikronukleusit është një analizë për të vlerësuar dëmtimet kromozomale si pasojë e ekspozimit ndaj mutagjenit. Është e rëndësishme në shqyrtimin e kimikateve që shkaktojnë formimin e boshtit dhe mikrobërthamave. Një analizë e mikronukleusit ofron informacion mbi stabilitetin e kimikateve kur ndërhyjnë në strukturën dhe funksionin e kromozomeve. Shumë kancerogjenë rezultojnë pozitivë në analizat e mikronukleusit. Procesi i analizës përfshin një trajtim kimik dhe matjen e frekuencës së qelizave të mikronukleuara. Nëse ka një rritje jonormale të numrit të qelizave të mikronukleuseve, del në përfundimin se kimikati shkakton dëme kromozomale.
Një analizë e mikronukleusit zakonisht kryhet në qelizat që ndahen në mënyrë aktive. Prandaj, eritrocitet dhe qelizat burimore të palcës kockore të prodhuara përmes ndarjeve të qelizave janë kandidatë idealë për analiza të tilla. Ata përjetojnë një qarkullim të vazhdueshëm dhe të shpejtë. Meqenëse eritrocitet nuk kanë bërthama të vërteta, ajo i bën qelizat me mikronukleare më të dukshme në fund të analizës.
Figura 01: Vëzhgimi i analizës së mikronukleusit
Analizat e mikronukleusit janë ekonomike, më të shpejta, të përshtatshme dhe kërkojnë më pak aftësi për t'u kryer. Ato pasqyrojnë shpejt devijimet kromozomale në një mënyrë të besueshme dhe janë jashtëzakonisht të dobishme për të vlerësuar shpejt dëmtimet kromozomale. Një lloj i veçantë dhe i gjithanshëm i analizës së mikronukleusit është analiza e citomës së mikronukleusit të bllokut të citokinezës (CBMNcyt). Është analiza e preferuar për të matur dëmtimin dhe paqëndrueshmërinë kromozomale në qeliza. Megjithatë, problemi kryesor i përdorimit të analizës së mikronukleusit është se ajo nuk është në gjendje të përcaktojë lloje të ndryshme të aberracioneve kromozomale, dhe analiza ka një ndikim në shkallën mitotike dhe proporcionin e vdekjes së qelizave, duke bërë që rezultatet të ndryshojnë.
Çfarë është Analiza e Kometës?
Analiza Kometa, e cila njihet edhe si analiza e elektroforezës me xhel të vetëm, është një teknikë e thjeshtë dhe e ndjeshme për të zbuluar dëmtimin e ADN-së. Ai mat ndarjet e ADN-së në qelizat eukariote dhe është një teknikë standarde për biomonitorimin dhe testimin e gjenotoksicitetit.
Anali i kometës është i përfshirë në kapsulimin e qelizave në suspensionet e agarozës me pikë shkrirjeje të ulët, lizën e qelizave në kushte neutrale ose alkaline dhe elektroforezën e qelizave të lizuara të pezulluara. Gjatë procesit të kapsulimit, qelizat pezullohen në agarozë të shkrirë me pikë shkrirjeje të ulët dhe agaroza formon një matricë fibrash karbohidrate për t'i ankoruar ato në vend. Agaroza është osmotike neutrale; prandaj, mundëson që tretësirat të depërtojnë përmes xhelit dhe të ndikojnë në qelizat pa i shqetësuar dhe zhvendosur ato. Tretësira e lizës është një solucion kripe ujore shumë e koncentruar dhe një detergjent. Kjo kripë prish proteinat dhe modelet e lidhjes brenda qelizës ndërsa prish përmbajtjen e ARN-së në qelizë. Qelizat shkatërrojnë dhe të gjitha proteinat, ARN-ja, përbërësit citoplazmatikë dhe nukleoplazmatikë, prishen dhe shpërndahen në matricën e agarozës, duke lënë ADN-në.
Figura 02: Analiza e kometës
Trelucioni i elektroforezës është një tretësirë alkaline ku spiralja e dyfishtë e ADN-së denatyrohet dhe nukleoidi bëhet me një fije floku. Gjatë këtij procesi, një fushë elektrike aplikohet për të analizuar imazhet. Analiza e imazhit mat intensitetin e përgjithshëm të fluoreshencës për ADN-në dhe nukleoidin dhe i krahason të dyja. Struktura e përgjithshme i ngjan një komete me një kokë rrethore që korrespondon me ADN-në e mbetur të padëmtuar dhe një bisht për ADN-në e dëmtuar. Sa më i ndritshëm dhe më i gjatë të jetë bishti për shkak të sinjaleve më të forta, aq më i lartë është niveli i dëmtimit.
Cilat janë ngjashmëritë midis analizës së mikronukleusit dhe kometës?
- Micronucleus dhe analiza e kometës janë ekonomike, më të shpejta, të përshtatshme dhe kërkojnë më pak aftësi.
- Kryhen kryesisht në ADN.
- Të dyja analizat ndihmojnë në vlerësimin e mutacioneve dhe anomalive kromozomale.
- Për më tepër, të dyja teknikat përdorin kimikate për të kryer procedurën.
Cili është ndryshimi midis analizës së mikronukleusit dhe kometës?
Anali i mikronukleusit është i rëndësishëm në kontrollimin e dëmtimit kromozomal si pasojë e ekspozimit të mutagjenit, ndërsa analiza e kometës është e rëndësishme në zbulimin e dëmtimit primar të ADN-së në qelizat individuale. Kështu, ky është ndryshimi kryesor midis analizës së mikronukleusit dhe kometës. Gjithashtu, analiza e mikronukleusit është e vendosur mirë për të zbuluar klastogenicitetin dhe aneugjenicitetin. Analiza e kometës përdoret si një test gjenotoksiciteti për të zbuluar dëmtimin primar të ADN-së në qeliza. Për më tepër, një analizë mikronukleusi jep informacion mbi stabilitetin e kimikateve, ndërsa një analizë kometë është një elektroforezë me xhel me një qelizë të vetme.
Infografia e mëposhtme paraqet ndryshimet midis analizës së mikronukleusit dhe kometës në formë tabelare për krahasim krah për krah.
Përmbledhje - Analiza e mikronukleusit kundër kometës
Analizat e gjenotoksicitetit ndihmojnë në vlerësimin e mundësive të mutacioneve dhe anomalive kromozomale. Analiza e mikronukleusit dhe analiza e kometës janë dy teknika nën analizat e gjenotoksicitetit. Analiza e mikronukleusit vlerëson dëmtimet kromozomale si pasojë e ekspozimit të mutagjenit. Analiza e kometës është një teknikë e thjeshtë dhe e ndjeshme për të zbuluar dëmtimin e ADN-së. Pra, ky është ndryshimi kryesor midis analizës së mikronukleusit dhe kometës. Analiza e mikronukleusit është e rëndësishme në shqyrtimin e kimikateve që shkaktojnë formimin e boshtit dhe mikrobërthamave. Analiza e kometës është e përfshirë në kapsulimin e qelizave në suspensionet e agarozës me pikë shkrirjeje të ulët, lizën e qelizave në kushte neutrale ose alkaline dhe elektroforezën e qelizave të lizuara të pezulluara.
