Dallimi kryesor midis analizës kolorimetrike dhe fluorometrike është se analiza kolorimetrike përcakton përqendrimin e përbërjeve me ngjyrë në një tretësirë ndërsa analiza fluorometrike përcakton mekanizmin kinetik të një tretësire.
Një analizë biokimike është një teknikë që zbulon ose kuantifikon në mënyrë analitike aktivitetin e një molekule ose substance biologjike. Është një proces in vitro. Analiza kolorimetrike dhe analiza fluorometrike janë dy lloje të analizave të zakonshme biokimike të kryera në laboratorë. Teknika të shumta si ELISA dhe western blotting janë gjithashtu analiza komplekse biokimike për përcaktimin sasior të aktivitetit metabolik dhe matjen e sjelljes funksionale të biomolekulave si proteinat, enzimat dhe molekulat e tjera të vogla. Këto lloj analizash përdoren për identifikimin e ndërveprimeve protein-ADN, protein-ARN dhe proteinë-proteinë.
Çfarë është një analizë kolorimetrike?
Një analizë kolorimetrike është një teknikë që përcakton përqendrimin e përbërjeve me ngjyrë në një tretësirë. Me fjalë të tjera, analiza kolorimetrike është një reagim që çon në një ndryshim të ngjyrës për shkak të një reaksioni enzimatik ose kimik midis reagentëve dhe analitëve. Testet kolorimetrike praktikohen në biokimi për të testuar enzimat, komponimet specifike, hormonet, antitrupat dhe analitet e tjera. Ata përdorin kolorimetra ose spektrofotometra. Kolorimetrat janë instrumente që karakterizojnë mostrat me ngjyra në mënyrë që të sigurojnë një masë objektive të karakteristikave të ngjyrave. Një spektrofotometër është një pajisje që mat intensitetin e dritës në funksion të ngjyrës ose gjatësisë së valës së dritës.
Figura 01: Analiza kolorimetrike
Si funksionon një analizë kolorimetrike?
Në një analizë kolorimetrike, një pjatë përgatitet me një antitrup të veçantë të lidhur në puse. Pastaj shtohet mostra. Kjo mund të lejojë që kampioni të lidhet me antitrupin. Pastaj një antitrup zbulues dhe një substrat shtohen në puset për të reaguar me sondën e zbulimit. Tretësira e ndalimit shtohet në fund para leximit. Një pus bosh i quajtur bosh mbetet pa mostër. Në analizën kolorimetrike, sa më e errët të jetë ngjyra, aq më i madh është përqendrimi i analitit. Zakonisht, vetëm një gjatësi vale nevojitet për të marrë leximin. Por nëse ka një matje referimi, përdoren dy ose më shumë gjatësi vale.
Çfarë është një analizë fluorometrike?
Analija fluorometrike është një teknikë që përcakton mekanizmin kinetik të reaksioneve enzimë. Një analizë fluorometrike kryhet me formimin e një produkti fluoreshent nga një substrat jofluoreshent ose anasjelltas. Kjo analizë përdor gjithashtu transferimin e energjisë së rezonancës fluoreshence (FRET) ku reaksioni enzimatik ndryshon pozicionin e dy fluoroforeve në substrat, duke ndryshuar kështu intensitetin e fluoreshencës.
Figura 02: Analiza fluorometrike
Analizat fluorometrike në përgjithësi janë shumë më të ndjeshme se analizat e tjera. Vlerësimet e enzimës diagnostike në mostrat e indeve, qelizave ose lëngjeve të pacientëve rriten për shkak të ndjeshmërisë së tyre më të lartë.
Si funksionon një analizë fluorometrike?
Në një analizë fluorometrike, një substrat i shtohet kampionit në pjatë dhe përgjigja e fluoreshencës merret duke përdorur lexuesin e pllakës. Këtu, çdo qelizë matet veçmas. Pllakat opake përdoren në analizat fluorometrike. Kjo zvogëlon shpërndarjen e dritës. Dy gjatësi vale janë të nevojshme për këtë lloj analize. Njëra gjatësi vale është për të zbuluar ngacmimin dhe gjatësia tjetër e valës është për emetimin.
Cilat janë ngjashmëritë ndërmjet analizës kolorimetrike dhe fluorometrike?
- Analiza kolorimetrike dhe analiza fluorometrike janë dy lloje të analizave biokimike.
- Të dyja analizat kryhen për diagnostikim mjekësor.
- Këto analiza përfshijnë një reaksion enzimatik.
- Të dyja analizat përfshijnë një substrat dhe analite.
Cili është ndryshimi midis analizës kolorimetrike dhe fluorometrike?
Një analizë kolorimetrike është një teknikë që përcakton përqendrimin e përbërjeve me ngjyrë në një tretësirë, ndërsa analiza fluorometrike është një teknikë që përcakton mekanizmin kinetik të reaksioneve enzimë. Pra, ky është ndryshimi kryesor midis analizës kolorimetrike dhe fluorometrike. Për më tepër, analizat fluorometrike janë më të ndjeshme se analizat kolorimetrike; kështu, analizat fluorometrike kanë aftësinë për të zbuluar më shumë analit. Kështu, ky është një tjetër ndryshim i rëndësishëm midis analizës kolorimetrike dhe fluorometrike. Për më tepër, analizat fluorometrike kërkojnë dy gjatësi vale, ndërsa analizat kolorimetrike kryhen me një gjatësi vale.
Infografia e mëposhtme pasqyron më shumë ndryshime midis analizës kolorimetrike dhe fluorometrike.
Përmbledhje – Analiza kolorimetrike vs fluorometrike
Një analizë biokimike është një proces analitik që përdoret për të përcaktuar dhe për të përcaktuar sasinë e reaksioneve metabolike qelizore. Analiza kolorimetrike dhe analiza fluorometrike janë dy lloje të analizave biokimike. Analiza kolorimetrike është një reagim që çon në një ndryshim të ngjyrës për shkak të një reaksioni enzimatik ose kimik midis reagentëve dhe analitëve ndërsa analiza fluorometrike është një teknikë që përdoret për të përcaktuar mekanizmin kinetik të reaksioneve enzimë. Të dy analizat varen nga një reaksion enzimatik që përfshin një substrat dhe një analit. Analizat fluorometrike janë më të ndjeshme se analizat kolorimetrike. Më e rëndësishmja, analizat fluorometrike kërkojnë dy gjatësi vale, ndërsa analizat kolorimetrike mund të kryhen vetëm me një gjatësi vale. Kështu, kjo përmbledh ndryshimin midis analizës kolorimetrike dhe fluorometrike.
