Dallimi kryesor midis amplifikimit të gjeneve dhe klonimit të gjeneve është se amplifikimi i gjenit është procesi i krijimit të shumë kopjeve të gjenit me interes in vitro nga një reaksion zinxhir polimerazë. Por, klonimi i gjeneve është një proces i bërjes së shumë kopjeve të gjenit me interes in vivo duke bërë një plazmid rekombinant dhe duke e transformuar atë në një bakter pritës.
Një gjen është një fragment specifik i ADN-së që kodon për një proteinë. Një organizëm posedon mijëra gjene. Për më tepër, është e mundur të shumëzohen sekuencat e ADN-së të gjeneve të rëndësishme duke përdorur teknika biologjike molekulare. Amplifikimi i gjeneve dhe klonimi i gjeneve janë dy procedura të tilla. Të dyja procedurat prodhojnë shumë kopje të një gjeni me interes. Megjithatë, ekziston një ndryshim midis amplifikimit të gjeneve dhe klonimit të gjeneve për sa i përket metodologjisë së tyre.
Çfarë është përforcimi i gjeneve?
Amplifikimi i gjenit është procesi i bërjes së kopjeve të një gjeni të veçantë duke përdorur reaksionin zinxhir polimerazë. Për të amplifikuar një gjen, ADN-ja e atij organizmi të veçantë duhet të nxirret duke përdorur një protokoll të duhur të nxjerrjes së ADN-së. Më pas ADN-ja e nxjerrë me dy vargje duhet të denatyrohet për të marrë fije të vetme të ndara. Hapi tjetër përfshin përdorimin e një reaksioni PCR për të bërë kopje të gjenit me interes. Për më tepër, përzierja PCR përmban primerët e nevojshëm, nukleotidet, enzimën e ADN polimerazës, ADN-në shabllon dhe përbërës të tjerë. Në fund të programit PRC, bëhet amplifikimi i gjenit me interes.
Figura 01: Përforcimi i gjenit
Për më tepër, amplifikimi i gjeneve është një hap fillestar në zbulimin e një sekuence specifike, identifikimin e një organizmi, diagnostikimin e sëmundjeve dhe krijimin e bibliotekave të gjeneve, etj.
Çfarë është klonimi i gjeneve?
Klonimi i gjeneve është një metodë në inxhinierinë gjenetike për të krijuar biblioteka gjenesh ose për të bërë shumë kopje të gjenit me interes. Ky proces përfshin krijimin e një plazmidi rekombinant dhe transformimin e plazmidit rekombinant në një qelizë pritëse, veçanërisht një qelizë bakteriale. Klon është një kopje identike e organizmit origjinal ose një molekule. Klonimi i gjeneve mund të krijojë mijëra klone gjenesh.
Figura 02: Klonimi i gjeneve
Pasi të identifikohet gjeni i interesit, ai mund të ndahet nga gjenomi i një organizmi të caktuar duke e kufizuar atë me enzima specifike kufizuese. Pastaj duke përdorur të njëjtën enzimë kufizuese, plazmidet (vektorët) duhet të hapen për të futur fragmentin e gjenit. Pastaj plazmidi rekombinant transformohet në një bakter pritës duke përdorur metoda të ndryshme si elektroporimi. Disa nga plazmidet rekombinante hyjnë në qelizat bakteriale bujtëse. Duke përdorur një antibiotik, bakteret e transformuara mund të zgjidhen, izolohen dhe kultivohen në mjedise të freskëta. Kështu, kjo teknikë ndihmon për të marrë miliona klone gjenesh.
Cilat janë ngjashmëritë midis përforcimit të gjeneve dhe klonimit të gjeneve?
- Amplifikimi i gjeneve dhe klonimi i gjeneve janë dy teknika biologjike molekulare.
- Në të dyja këto teknika, një sekuencë e veçantë e ADN-së ose një gjen shumëzohet në miliona ose mijëra herë.
- Për më tepër, të dyja teknikat janë të një rëndësie të madhe për shumë fusha shkencore.
Cili është ndryshimi midis përforcimit të gjeneve dhe klonimit të gjeneve?
Amplifikimi i gjenit është një proces që bën kopje të një gjeni të veçantë duke përdorur metodën in vitro të quajtur PCR. Nga ana tjetër, klonimi i gjeneve është një proces që bën kopje të një gjeni të veçantë duke përdorur metodën in vivo nëpërmjet ndërtimit të vektorëve rekombinantë dhe shumëzimit të tyre në organizmin e gjallë. Pra, ky është ndryshimi kryesor midis amplifikimit të gjeneve dhe klonimit të gjeneve. Për më tepër, përforcimi i gjenit zgjat vetëm disa orë ndërsa klonimi i gjeneve kërkon disa ditë për të përfunduar. Prandaj, ne mund ta konsiderojmë këtë gjithashtu si një ndryshim midis amplifikimit të gjeneve dhe klonimit të gjeneve. Për më tepër, procesi i amplifikimit të gjeneve tregon më pak gabime, ndërsa procesi i klonimit të gjeneve tregon më shumë gabime.
Infografia e mëposhtme përmbledh ndryshimin midis amplifikimit të gjeneve dhe klonimit të gjeneve.
Përmbledhje – Përforcimi i gjenit kundrejt klonimit të gjeneve
Amplifikimi i gjenit është procesi i bërjes së kopjeve të gjenit të dëshiruar duke përdorur reaksionin zinxhir të polimerazës në kushte in vitro ndërsa klonimi i gjeneve është procesi i bërjes së kopjeve të një gjeni me interes duke përdorur një molekulë ADN-je rekombinante dhe një organizëm/strehues të gjallë bakteri. Kështu, ky është ndryshimi themelor midis amplifikimit të gjeneve dhe klonimit të gjeneve.
