Dallimi kryesor midis izolimit të ADN-së dhe ARN-së është se izolimi i ADN-së është një procedurë ku një lloj acidi nukleik i quajtur ADN nxirret nga një qelizë biologjike, ndërsa izolimi i ARN-së është një procedurë ku një lloj acidi nukleik i quajtur ARN është nxjerrë nga një qelizë biologjike.
Izolimi i acidit nukleik është pika fillestare në një grup të gjerë aplikimesh në rrjedhën e poshtme. Cilësia e lartë e acideve nukleike në mostrat fillestare është një faktor kyç për suksesin e aplikimeve të mëvonshme në rrjedhën e poshtme. Izolimi i acidit nukleik mund të përkufizohet si një seri hapash për të marrë acidin nukleik në një mostër pastërtie që mund të përdoret për hapa të ndryshëm aplikimi në rrjedhën e poshtme. Qëllimi i nxjerrjes së acidit nukleik është të shpërbëjë membranën qelizore dhe të arrijë eliminimin maksimal të lipideve dhe proteinave për të marrë acide nukleike të pastra si ADN ose ARN.
Çfarë është izolimi i ADN-së?
Izolimi i ADN-së është një procedurë rutinë ku një lloj acidi nukleik i quajtur ADN nxirret nga një qelizë biologjike. Izolimi i ADN-së kryhet duke nxjerrë ADN-në nga gjaku, mostrat e indeve të ngrira dhe blloqet e indeve parafine. Ekzistojnë tre hapa kryesorë në izolimin e ADN-së, duke përfshirë lizën e qelizave, nxjerrjen e ADN-së dhe precipitimin. Në lizën e qelizave, qelizat në një mostër ndahen nga njëra-tjetra shpesh me mjete fizike si bluarja ose vorbullimi dhe futen në një tretësirë që përmban kripë. Zakonisht, jonet e natriumit të ngarkuar pozitivisht në kripë ndihmojnë në mbrojtjen e grupeve të fosfatit të ngarkuar negativisht që kalojnë përgjatë shtyllës kurrizore të ADN-së. Më vonë, shtohet një detergjent për të zbërthyer lipidet në membranën qelizore dhe bërthamat, të cilat lëshojnë ADN-në ndërsa këto membrana prishen.
Figura 01: Izolimi i ADN-së
Nxjerrja e ADN-së kryhet për të marrë një mostër të pastër të ADN-së. Shpesh, një enzimë proteazë shtohet për të degraduar proteinat e lidhura me ADN-në dhe proteinat e tjera qelizore. Për më tepër, disa nga mbeturinat qelizore mund të hiqen duke filtruar kampionin. Së fundi, ADN-ja precipitohet duke përdorur alkool. Për më tepër, nëse ka shumë ADN, mund të vërehet një precipitat i bardhë koprrac në fund të procedurës.
Çfarë është izolimi i ARN?
Izolimi ARN është një procedurë ku një lloj acidi nukleik i quajtur ARN nxirret nga një qelizë biologjike. Kjo procedurë shpesh ndërlikohet nga prania e enzimave të ribonukleazës në qeliza dhe inde që degradojnë ARN-në. Në biologjinë molekulare përdoren disa metoda për të izoluar ARN-në nga mostrat, si nxjerrja e guanidinium-tiocianat-fenol-kloroformit.
Figura 02: Izolimi i ARN-së
Izolimi ARN zakonisht përbëhet nga disa hapa, duke përfshirë lizën dhe homogjenizimin e qelizave, shuarjen e proceseve biokimike, ndarjen e acidit nukleik, marrjen e ARN-së, pastrimin e papërpunuar dhe vlerësimin e cilësisë së ARN-së. Metoda e lizës dhe elucionit me bazë letre filtri ka një kapacitet të lartë xhiro në nxjerrjen e ARN-së. Për më tepër, nxjerrja e ARN-së në azot të lëngshëm duke përdorur një llaç dhe shtypës është gjithashtu një metodë shumë e dobishme pasi parandalon aktivitetin e ribonukleazës.
Cilat janë ngjashmëritë ndërmjet izolimit të ADN-së dhe ARN-së?
- Izolimi i ADN-së dhe ARN-së janë dy lloje të procedurave të izolimit të acidit nukleik.
- Të dyja procedurat kanë hapa të ngjashëm bazë, të tillë si liza, nxjerrja dhe pastrimi i qelizave.
- Këto procedura izolojnë lloje të rëndësishme të acideve nukleike që kanë një numër aplikimesh në rrjedhën e poshtme.
- Ato kryhen në mjedise laboratorike.
- Mund të kryhen duke përdorur komplete të prodhuara.
Cili është ndryshimi midis izolimit të ADN-së dhe ARN-së?
Në izolimin e ADN-së, një lloj acidi nukleik i quajtur ADN nxirret nga një qelizë biologjike, ndërsa në izolimin e ARN-së, një lloj acidi nukleik i quajtur ARN nxirret nga një qelizë biologjike. Kështu, ky është ndryshimi kryesor midis izolimit të ADN-së dhe ARN-së. Për më tepër, izolimi i ADN-së zakonisht kryhet në rreth pH 7 deri në 8 ndërsa izolimi i ARN-së kryhet zakonisht në pH 4,5.
Infografia e mëposhtme paraqet ndryshimet midis izolimit të ADN-së dhe ARN-së në formë tabelare për krahasim krah për krah.
Përmbledhje – Izolimi i ADN-së kundrejt ARN-së
Izolimi i ADN-së dhe ARN-së janë dy lloje të procedurave të izolimit të acidit nukleik. Izolimi i ADN-së është një procedurë gjatë së cilës ADN-ja nxirret nga një qelizë biologjike. Izolimi i ARN-së është një procedurë gjatë së cilës ARN-ja nxirret nga një qelizë biologjike. Pra, ky është ndryshimi kryesor midis izolimit të ADN-së dhe ARN-së.
