Dallimi kryesor midis hibridit të majave një dhe hibridit të majasë dy është se majaja një hibride është një analizë e bazuar në in vitro për të analizuar ndërveprimet ADN-proteinë ndërsa maja dy hibride është një analizë e bazuar në in vitro për të analizuar ndërveprimet proteinë-proteinë.
Studimi i ndërveprimeve ndërmjet molekulave qelizore mund të ndihmojë në përcaktimin e vendeve të njohjes të përfshira në shprehjen e gjeneve dhe rrugët e proteinave. Ndërveprimet e ADN-së dhe proteinave janë pjesë përbërëse e proceseve qelizore si modifikimet e ADN-së dhe rregullimi i transkriptimit, etj. Nga ana tjetër, ndërveprimet e proteinave dhe proteinave luajnë rol jetik në proceset qelizore si replikimi, transkriptimi, përkthimi dhe transduksioni i sinjalit. Prandaj, është jashtëzakonisht e rëndësishme të identifikohen këto ndërveprime të molekulave qelizore përmes analizave të ndryshme. Maja një hibrid dhe maja dy hibride janë dy analiza të bazuara in vitro për të analizuar ndërveprimet ADN-proteinë dhe proteinë-proteinë.
Çfarë është Yeast One Hybrid?
Hibridi i majës një (Y1H) është një analizë e bazuar në in vitro për të analizuar ndërveprimet ndërqelizore ADN-proteinë. Kjo metodë u krijua për herë të parë nga Wang dhe Reed në 1993. Që atëherë, ajo ka treguar një fuqi më të madhe në kërkimin biologjik. Në këtë analizë, ekzistojnë dy komponentë kryesorë: karremi i ADN-së dhe gjahu i proteinave.
Figura 01: Maja Një Hibrid
Në procedurë, një sekuencë ADN-je (karrem ADN) klonohet fillimisht në rrjedhën e sipërme të dy raportuesve të ndryshëm (HIS3, LacZ). Këto konstruksione raportuese janë integruar në gjenomin e një shtame majash. Faktorët e transkriptimit merren si pre e proteinave. Faktorët transkriptues shkrihen me domenin e aktivizimit transkriptues (AD) të faktorit transkriptues të majave Gal4 në mënyrë që të prodhohen proteina hibride. E gjithë kjo proteinë hibride integrohet në një plazmid përpara se të futet në tendosjen e majave. Pas futjes së plazmidit rekombinant, kur faktori transkriptues ndërvepron me fragmentin e ADN-së, pjesa AD aktivizon shprehjen e gjenit raportues (HIS3 ose LacZ). Sekuenca e plazmideve lejon identifikimin e faktorit transkriptues që mund të lidhet me fragmentin e ADN-së. Kohët e fundit, një metodë hibride e majave është përdorur për të hulumtuar diagnozën e sëmundjeve. Prandaj, në të ardhmen, kjo analizë do të përdoret më gjerësisht në kërkimin shkencor dhe trajtimet mjekësore.
Çfarë është Yeast Two Hybrid?
Yaast two hibrid (Y2H) është një analizë e bazuar në in vitro për të analizuar ndërveprimet ndërqelizore të proteinave dhe proteinave. Kjo metodë u gjet fillimisht nga Stanley Fields dhe Ok-Kyu Song në 1989. Kjo teknikë zbulon ndërveprimet protein-proteinë duke përdorur faktorin e transkriptimit Gal4 të majave.
Figura 02: Maja dy Hibride
Në këtë metodë, fillimisht ndërtohen dy shkrirje (hibride) duke përdorur proteinat me interes: duke shkrirë një proteinë me domenin e lidhjes së ADN-së (DBD) dhe duke shkrirë proteinën tjetër me domenin aktivizues (AD) të faktorit të transkriptimit Gal4.. Proteina e shkrirë me DBD njihet si karrem ndërsa, proteina e shkrirë me AD njihet si pre. Në tendosjen e majave, pas ndërveprimit të karremit dhe gjahut, DBD dhe AD sillen në afërsi për të gjeneruar një faktor transkriptues Gal4 funksional në rrjedhën e sipërme të gjenit raportues. Faktori funksional i transkriptimit aktivizon shprehjen e gjenit raportues. Për më tepër, kjo metodë përdoret aktualisht për të kontrolluar ndërveprimet e proteinave integrale të membranës në qelizat e gjitarëve.
Cilat janë ngjashmëritë midis Maja një Hibrid dhe Maja Dy Hibrid?
- Maja një hibrid dhe maja dy hibride janë dy analiza të bazuara in vitro për të analizuar ndërveprimet ADN-proteinë dhe proteinë-proteinë.
- Këto analiza përdorin shtame majash.
- Të dyja analizat përdorin domenin e aktivizimit (AD) të faktorit të transkriptimit Gal4.
- Ata përdorin shprehjen e gjenit raportues (HIS3, ose LacZ) për të zbuluar ndërveprimet.
- Ata kanë karrem dhe pre.
- Të dyja analizat janë shumë të dobishme në kërkimet moderne biologjike.
Cili është ndryshimi midis Maja një Hibrid dhe Maja Dy Hibrid?
Yaast one hibrid është një analizë e bazuar në in vitro për të analizuar ndërveprimet e ADN-së dhe proteinave ndërsa hibridi i majave dy është një analizë e bazuar në in vitro për të analizuar ndërveprimet e proteinave dhe proteinave. Kështu, ky është ndryshimi kryesor midis majasë një hibride dhe maja dy hibride. Për më tepër, në një hibrid maja, karremi është një fragment i ADN-së dhe preja është një molekulë proteine. Nga ana tjetër, në maja dy hibride, si karremi ashtu edhe gjahu janë molekula proteinike.
Infografia e mëposhtme liston ndryshimet midis majasë një hibride dhe maja dy hibride në formë tabelare për krahasim krah për krah.
Përmbledhje – Maja Një Hybrid vs Maja Dy Hybrid
Maja një hibrid dhe maja dy hibride janë dy analiza të rëndësishme të bazuara in vitro. Hibridi i majave është një analizë e bazuar në in vitro për të analizuar ndërveprimet e ADN-së dhe proteinave ndërsa hibridi i majave dy është një analizë e bazuar në in vitro për të analizuar ndërveprimet e proteinave dhe proteinave. Kështu, ky është ndryshimi kryesor midis majasë një hibride dhe maja dy hibride.
