Dallimi kryesor – HPLC vs HPTLC
Dallimi kryesor midis HPLC dhe HPTLC është se HPLC lejon ndarjen sasiore të komponentëve në një kampion ndërsa HPTLC nuk lejon ndarjen sasiore të komponentëve në një mostër.
Kromatografia është një metodë e ndarjes fizike që përdoret për të ndarë dhe identifikuar përbërësit në një përzierje. Të dy HPLC dhe HPTLC janë teknika kromatografike. HPLC është kromatografi e lëngshme me performancë të lartë. HPTLC është kromatografi me shtresë të hollë me performancë të lartë.
Çfarë është HPLC?
HPLC është kromatografi e lëngshme me performancë të lartë. Është një teknikë analitike që përdoret për të ndarë, identifikuar dhe përcaktuar sasinë e përbërësve në një përzierje. Në këtë teknikë, kampioni shpërndahet në një tretës të përshtatshëm. Pastaj tretësi me mostrën kalohet përmes një pompe me një presion të caktuar. Pompa është e mbushur me material të ngurtë adsorbues. Pastaj disa përbërës lidhen fort me materialin absorbues ndërsa përbërës të tjerë lidhen lirshëm. Kjo bën që komponentët të kenë shpejtësi të ndryshme rrjedhjeje përmes pompës. Prandaj, komponentët mund të ndahen lehtësisht.
Figura 01: Një sistem HPLC
Materiali adsorbent që mbush pompën njihet si faza stacionare. Tretësi me mostrën e tretur njihet si faza e lëvizshme. Pompa e përdorur në këtë teknikë quhet kolonë. Kolona është e mbushur me një material adsorbues, më së shpeshti, grimca silicë. Madhësia e këtyre grimcave mund të variojë nga 2-50 μm. Procesi i ndarjes ndikohet nga përbërja e fazës së lëvizshme dhe temperatura e sistemit. Ndërveprimet ndërmjet fazës stacionare dhe komponentit në kampion mund të jenë ndërveprime hidrofobike, ndërveprime dipol-dipol, lidhje jonike, etj.
Presioni i funksionimit të HPLC është dukshëm më i lartë se ai i kromatografisë tradicionale të lëngshme. Shtrihet rreth 50-350 bar. Dallimi midis kromatografisë së lëngshme dhe HPLC është se në kromatografinë e lëngshme, kampioni bie përmes kolonës nën gravitetin ndërsa, në HPLC, kampioni nën presion përmes kolonës. Madhësia e kolonës dhe grimcat absorbuese janë gjithashtu shumë të vogla kur krahasohen me kromatografinë tradicionale të lëngshme. Megjithatë, rezolucioni i dhënë nga teknika HPLC është superiore.
Çfarë është HPTLC?
HPTLC është kromatografi me shtresë të hollë me performancë të lartë. Është forma e avancuar dhe e automatizuar e TLC tradicionale. Kjo teknikë siguron një zgjidhje efikase në një periudhë të shkurtër kohe. Në këtë metodë analize, kampioni dhe një referencë mund të analizohen në të njëjtën kohë, gjë që lejon krahasimin e mostrës me referencën. Ai jep një saktësi analitike të përmirësuar se teknikat e tjera kromatografike. Koha e marrë për analizë është më e vogël. Teknika është një teknikë me kosto të ulët.
Figura 02: Një analizë e ngjyrave ushqimore duke përdorur HPTLC
Metoda HPTLC është një proces i thjeshtë, dhe hapi i përgatitjes së kampionit gjithashtu eliminohet (Në TLC tradicionale, hapi i përgatitjes së kampionit përfshihet para ndarjes. Ky hap përfshin pastrimin dhe pasurimin). Tretësi mund të përdoret drejtpërdrejt pa ndonjë para-trajtim edhe pse teknikat e tjera kromatografike kërkojnë trajtime paraprake si degazimi, filtrimi, etj.
Materiali adsorbent i përdorur në HPTLC është silicë me madhësi grimcash shumë të vogla. Në TLC tradicionale, madhësia e grimcave të silicës është 5-20 μm ndërsa, në HPTLC, është 4-8 μm. Mostra aplikohet në pllakën HPTLC duke përdorur një aplikues. Ai jep një aplikim uniform dhe të sigurt. Pastaj pllakat vendosen në një dhomë që ka fazën e lëvizshme. Dhoma duhet të jetë e ngopur me avujt e fazës së lëvizshme. Pas procesit HPTLC, njollat që kanë lëvizur mund të zbulohen. Kur zbulon njollat në pjatë, teknika HPTLC përdor një zonë të përshtatshme UV ose një dhomë jodi.
Cili është ndryshimi midis HPLC dhe HPTLC?
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC është kromatografi e lëngshme me performancë të lartë. | HPTLC është kromatografi me shtresë të hollë me performancë të lartë. |
| Teknika | |
| Në HPLC, faza e lëvizshme me tretësin kalohet përmes një kolone të mbushur me fazën stacionare. | Në HPTLC, mostra dallohet në një pllakë TLC dhe vendoset brenda një dhome që përmban fazën e lëvizshme; atëherë kampioni lejohet të migrojë lart në pllakë së bashku me fazën e lëvizshme. |
| Matje | |
| Në HPLC, diferencat midis shkallës së rrjedhës së komponentëve nëpër kolonë përdoren për të ndarë përbërësit në mostër. | Në HPTLC, diferencat midis distancave të përshkuara nga secili komponent në mostër përdoren për të ndarë komponentët në mostër. |
| Ndarje sasiore | |
| HPLC lejon ndarjen sasiore të komponentëve në një kampion. | HPTLC nuk lejon ndarjen sasiore të komponentëve në një kampion. |
Përmbledhje – HPLC vs HPTLC
HPLC dhe HPTLC janë dy teknika kromatografike. Dallimi kryesor midis HPLC dhe HPTLC është se HPLC lejon ndarjen sasiore të komponentëve në një mostër ndërsa HPTLC nuk lejon ndarjen sasiore të komponentëve në një mostër.
