Diferenca kryesore – HPLC vs LCMS
Le të shohim së pari kuptimin e HPLC dhe LCMS përpara se të analizojmë ndryshimin midis HPLC dhe LCMS. Kromatografia është një teknikë e ndarjes në analizën kimike ku përbërësit e mostrës ndahen gjatë kalimit nëpër një mjedis kromatografik. Ai gjithashtu përfshin ndërveprimin me kampionin, fazën stacionare dhe fazën e lëvizshme. HPLC qëndron për Kromatografinë e lëngshme me Performancë të Lartë dhe përdoret si metodë e kromatografisë së lëngshme në kiminë analitike. Kombinimi i kromatografisë së lëngët dhe spektroskopisë masive (LCMS) është zhvilluar për analizën sasiore të biomolekulave të përzgjedhura dhe është një procedurë analize shumë e ndjeshme, e saktë dhe specifike në krahasim me HPLC. Ky është ndryshimi kryesor midis HPLC dhe LCMC. Ky artikull do t'ju prezantojë me HPLC dhe LCMC që merren me analizat kimike dhe diskutojnë ndryshimet midis HPLC dhe LCMS.
Çfarë është HPLC?
Kromatografia e lëngshme me performancë të lartë (HPLC) është një teknikë e njohur e ndarjes në kiminë analitike. Përdoret kryesisht për të ndarë përbërësit, për të identifikuar dhe për të përcaktuar sasinë e secilit përbërës në një përzierje. Më parë, kjo metodë njihej si kromatografia e lëngshme me presion të lartë, sepse varej nga pompat për të rrjedhur një tretës të lëngshëm nën presion që përfshin përzierjen e mostrës përmes një kolone të mbushur me një material adsorbues të ngurtë. Çdo përbërës në përzierjen e mostrës ndërvepron ndryshe me materialin e ngurtë adsorbent, gjë që rezulton në shpejtësi të ndryshme rrjedhjeje për përbërës të ndryshëm. Kjo mund të çojë në ndarjen e përbërësve ndërsa ato rrjedhin nga kolona HPLC.
HPLC është përdorur për aplikime të ndryshme si analiza e niveleve të vitaminës D në gjak, përdorimi i paligjshëm i drogës nga atletët duke zbuluar mbetjet e drogës në urinën e tyre, klasifikimi i përbërësve të një kampioni kompleks biologjik për qëllime kërkimore dhe analize. dhe prodhimi i produkteve farmaceutike.
Çfarë është LCMS?
Kromatografia e lëngshme–spektrometria e masës (LCMS) është një teknikë analitike që kombinon aftësitë e ndarjes fizike të kromatografisë së lëngshme me aftësitë e analizës së masës të spektrometrisë së masës (MS). Kromatografia e lëngshme është një teknikë e ndarjes dhe spektrometria e masës përdoret për të analizuar raportin masë ndaj ngarkesës së grimcave të ngarkuara. Ndarja fizike zakonisht arrihet me HPLC dhe alternativisht, LCMS i njohur gjithashtu si HPLC-MS. LCMS është një teknikë analitike dominuese që ka një saktësi, ndjeshmëri dhe specifikë shumë të lartë në krahasim me HPLC. Kështu, është i dobishëm në shumë aplikacione si qëllime kërkimore, analiza të barnave, analiza ushqimore, etj. LCMS përdoret kryesisht për të ndarë, zbuluar, identifikuar dhe përcaktuar sasinë e vetive biokimike të një kampioni të caktuar në prani të përzierjeve kimike komplekse.
Cili është ndryshimi midis HPLC dhe LCMC?
Akronimi dhe përkufizimi i HPLC dhe LCMC
HPLC: HPLC do të thotë Kromatografi e lëngshme me performancë të lartë. Është një teknikë e ndarjes që përdoret kryesisht për të ndarë përbërësit, për të identifikuar dhe për të përcaktuar sasinë e secilit përbërës në një përzierje.
LCMS: LCMS do të thotë Kromatografia e lëngshme dhe spektrometria e masës. Është një teknikë analitike që kombinon aftësitë e ndarjes fizike të kromatografisë së lëngshme me aftësitë e analizës së masës së spektrometrisë së masës (MS).
Karakteristikat e HPLC dhe LCMC
Klasifikimi
HPLC: Kjo është vetëm një metodë e kromatografisë së lëngshme.
LCMS: Ky është një kombinim i metodës së kromatografisë së lëngshme dhe metodës së spektrometrisë së masës.
Efiçenca
HPLC: Krahasuar me LCMS, analiza HPLC është më pak efikase dhe më e ngad altë.
LCMS: Krahasuar me HPLC, analiza LCMS është efikase dhe më e shpejtë.
Ndjeshmëri
HPLC: Krahasuar me LCMS, analiza HPLC është më pak e ndjeshme.
LCMS: Krahasuar me HPLC, analiza LCMS është më e ndjeshme.
Specifikiteti
HPLC: Krahasuar me LCMS, analiza HPLC është më pak specifike.
LCMS: Krahasuar me HPLC, analiza LCMS është më specifike.
Saktësi
HPLC: HPLC jep rezultate më pak të sakta se LCMS për përcaktimin e disa kimikateve.
LCMS: LCMS jep rezultate më të sakta se HPLC për përcaktimin e disa kimikateve.
Komponent
HPLC: HPLC mund të konsiderohet si një komponent i LCMS.
LCMS: LCMS nuk mund të konsiderohet si një komponent i HPLC.
Burimi jon
HPLC: Burimi i joneve nuk ekziston në instrumentin HPLC.
LCMS: Burimi i joneve është i pranishëm në instrumentin LCMS.
Aplikacione
HPLC: Jonet, polimeret, molekulat organike dhe biomolekulat mund të analizohen duke përdorur HPLC.
LCMS: Molekulat organike dhe biomolekulat mund të analizohen. Në kontrast me HPLC, LCMS mund të përdoret për të ekzaminuar përzierjet e zgjidhura jo plotësisht.
Operacioni
HPLC: Diagrami i një instrumenti HPLC është dhënë në figurën 1, dhe zakonisht përfshin një kampionues automatik, pompa dhe një detektor. Mostra e fut përzierjen e mostrës në fazën e lëvizshme (përzierje nën presion të tretësve si uji, acetonitrili dhe/ose metanoli) e cila e transferon atë në kolonë. Pompat japin rrjedhën dhe përbërjen e dëshiruar të fazës së lëvizshme përmes kolonës. Kolona është e mbushur me adsorbent, i cili është një grimcë e ngurtë me kokrriza si silicë ose polimere. Detektori prodhon një sinjal në përpjesëtim me sasinë e pranisë së përbërësit të kampionit në kolonë, duke lejuar kështu analizën sasiore të përbërësve të përzgjedhur të mostrës. Instrumenti HPLC kontrollohet dhe analiza e të dhënave sigurohet nga një mikroprocesor dixhital dhe softueri i përdoruesit.
Figura 1: Diagrami i instrumentit HPLC
LCMS: Diagrami i instrumentit LCMS është dhënë në figurën 2. Ekstrakti i mostrës futet në kolonën e përbërë nga HPLC. Kjo kolonë ruan metabolitët e mostrës bazuar në karakteret fizike dhe metabolitë të ndryshëm rrjedhin në spektrometrin e masës në intervale të ndryshme kohore. Spektroskopia e masës përdoret për vlerësimin e masave të grimcave, për përcaktimin e renditjes elementare të një molekule dhe për sqarimin e strukturave të molekulës. Megjithatë, kampioni duhet të jonizohet për të gjeneruar molekula të ngarkuara në mënyrë që të përcaktohen raportet e tyre masë ndaj ngarkesës. Prandaj, në vend të instrumenteve HPLC, LCMS përbëhet nga tre module shtesë si burimi i hekurit, një analizues i masës dhe një detektor. Një burim joni mund të transformojë mostrën e fazës së gazit në jone dhe një analizues i masës që grupon jonet sipas masave të tyre duke përdorur fusha elektromagnetike. Së fundi, një detektor përcakton vlerat dhe jep të dhëna për secilin jon të pranishëm në mostër. Teknika LCMS mund të përdoret si për aplikime cilësore ashtu edhe për ato sasiore.
Figura 2: Diagrami i instrumentit LCMS
Si përfundim, HPLC është një metodë kromatografie e lëngshme ndërsa LCMS është një kombinim i kromatografisë së lëngshme dhe spektrometrisë së masës. Të dyja këto teknika analize kanë karakteristika të ndryshme, por ato mund të përdoren për të identifikuar dhe për të përcaktuar sasinë e përbërjeve ushqimore, farmaceutike dhe molekulave të tjera bioaktive.
